货号:UPLC-MS-4618 | 规格:100T/96S | 微量法 |
货号:UPLC-MS-4617 | 规格:50T/48S |
可见分光光度法 |
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 100 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂二 |
液体 5 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂三 |
粉剂×2 瓶 |
4℃保存 |
标准品 |
液体 1 mL×1 支 |
4℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂三:临用前配制,加入 5 mL 蒸馏水,充分溶解后加入 2.5mL 试剂二,混匀;
2、 标准品:1mmol/L 无机磷标准液。
无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等, 此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量。
最低检出限:0.0302 mmol/L
线性范围:0.625-8 mmol/L
需自备的仪器和用品:
离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器和蒸馏水。
取约 0.1g 组织,加试剂一 1mL 冰上充分匀浆,4℃,10000rpm,离心 10min,取上清液,待测。
试剂名称(μL) |
空白管 |
标准管 |
测定管 |
标准液 |
|
10 |
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上清液 |
|
|
10 |
蒸馏水 |
100 |
90 |
90 |
试剂三 |
100 |
100 |
100 |
混匀后置于 40℃水浴保温 10min,室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度,分别记为 A 空白管、A 标准管、A测定管。 注意:需在40min 内完成比色。
三、组织无机磷含量计算
组织无机磷含量(mmol/g 质量)= [C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×V 总÷W=0.001×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷W
C 标准液:1mmol/L;V 总:上清液总体积,1mL=0.001 L;W:样本质量,g。
1、试剂三需临用前配制,限当天使用。
2、测定前先用 1~2 个样本做预实验,如吸光值大于 1.5,需用蒸馏水做相应稀释。
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