货号:UPLC-MS-4620 | 规格:100T/96S | 微量法 |
货号:UPLC-MS-4619 | 规格:50T/48S | 可见分光光度法 |
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 20 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂二 |
液体 7 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂三 |
粉剂×2 瓶 |
4℃保存 |
标准品 |
液体 1 mL×1 支 |
4℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:强腐蚀性,强氧化性;
2、 试剂三:临用前配制,加入 5 mL 蒸馏水,溶解后再加入 2.5 mL 试剂二,混匀;
3、 标准品:1mmol/L 无机磷标准液。
磷的存在形态包括无机磷与有机磷。无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等。通过测定总磷与无机磷含量即可了解作物对磷的利用率,进而为合理施肥提供依据。
总磷经消化后,转化成无机磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法,一定条件下,钼蓝与磷酸根生成660nm 有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量,进而可计算出组织中总磷含量。
最低检出限:0.0338 mmol/L
线性范围:0.625-8 mmol/L
需自备的仪器和用品:
离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、蒸馏水和浓硫酸。
称取约 0.1g 组织于带盖试管中,加浓硫酸 1 mL,盖紧(封口膜封口,防止水分散失)后沸水浴 10min 左右, 待溶液呈黑色或棕色时取出。稍冷后,加试剂一 200μL,充分混匀,盖紧后继续沸水浴,直到溶液呈透明状,取出室温冷却后,加蒸馏水 3.8 mL,充分混匀;室温,10000rpm,离心 10min,取上清液,待测。
1、分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长到 660 nm,蒸馏水调零。
2、打开水浴锅,调节温度到 40℃。
3、样本测定:
试剂名称(μL) |
空白管 |
标准管 |
测定管 |
标准液 |
|
10 |
|
上清液 |
|
|
10 |
蒸馏水 |
100 |
90 |
90 |
试剂三 |
100 |
100 |
100 |
混匀后置于 40℃水浴保温 10min,室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度,分别记为 A 空白管、A 标准管、A测定管。
总磷含量(mmol /g 质量)= [C 标准液×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)]×V 总÷W= 0.005×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷W
C 标准液:1 mmol/L;V 总:上清液总体积,5 mL=0.005 L;W:样本质量,g。
1、试剂三需临用前配制,限当天使用。
2、测定前先用 1~2 个样本做预实验,如吸光值大于 1.5 时,需用蒸馏水做相应稀释。
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