货号:UPLC-MS-4109 | 规格:100T/96S | 微量法 |
货号:UPLC-MS-4108 | 规格:50T/48S |
可见分光光度法 |
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 50 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂二 |
液体 50 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三 |
液体 13 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
标准品 |
粉剂×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:1.标准品:10 mg 无水葡萄糖。临用前加 1 mL 蒸馏水溶解为 10 mg/mL 的葡萄糖标准品备用,2-8℃保存两周。
产品说明:
糖类物质是构成植物体的重要成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖,麦芽糖以及可能部分水解的淀粉。总糖酸水解为还原糖,还原糖在碱性条件下与DNS试剂共热后被还原成氨基化合物,在碱性溶液中呈红棕色,还原糖的量与桔红色物质颜色的深浅成正比关系,以此测定样本中的总糖含量。
技术指标:
最低检出限:0.0444 mg/mL
线性范围:0.1-1 mg/mL
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
1、组织样本的处理:称取约 0.1g 样本于 10mLEP 管中,加入 1mL 试剂一,1.5mL 蒸馏水,研磨匀浆,沸水浴 30min,加入 1mL 试剂二,涡旋混匀,用蒸馏水定容至 10mL,8000g,25℃离心 10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)。
2、血清(浆)、液体样本的处理:取 0.1mL 血清(浆)于 1mLEP 管中,加入 0.1mL 试剂一,0.15mL 蒸馏水, 匀浆,沸水浴 30min,加入 0.1mL 试剂二,涡旋混匀,用蒸馏水定容至 1mL,8000g,25℃离心 10min,取上清液待测。(注意稀释,见注意事项)。
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至 1、0.8、0.5、0.2、0.1mg/mL,标准液稀释可参考表:实验中每个标准管需 150µL 标准溶液。
3、加样表:
试剂(μL) |
空白管 |
测定管 |
标准管 |
蒸馏水 |
150 |
- |
- |
样本 |
- |
150 |
- |
标准品 |
- |
- |
150 |
试剂三 |
150 |
150 |
150 |
涡旋混匀,沸水浴 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温 |
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蒸馏水 |
900 |
900 |
900 |
1、标准曲线的绘制:根据标准管的浓度(x,mg/mL)和吸光度ΔA标准(y,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,mg/mL)。
2、按样本质量计算:总糖(mg/g 质量)=(x×V 样总)÷W× 稀释倍数=10×x÷W× 稀释倍数
3、按血清(浆)、液体体积计算:总糖(mg/mL)=(x×V 提)÷V 样×稀释倍数=10×x× 稀释倍数
V 样总:样本体积总体积,10mL;W:样本质量,g;V 提:液体或血清样本总体积,1mL;V 样:液体或血清体积,0.1mL。注意事项:
1、此试剂盒对于纤维素的分解程度无法达到 100%。
2、如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。注意同步修改计算公式。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到