上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
| 货号：UPLC-MS-4227 | 规格：100T/48S | 微量法 |
| 货号：UPLC-MS-4226 | 规格：50T/24S | 可见分光光度法 |
产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
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试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
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提取液 |
液体 30 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂一 |
液体 4 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂二 |
液体 10 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂三 |
液体 13 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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标准品 |
粉剂×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：标准品：10mg 无水葡萄糖（干燥失重<0.2%）。临用前加入 1mL 蒸馏水溶解，配制成 10mg/mL 葡萄糖溶液备用，2-8℃可保存两周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
产品说明：
CL（EC 3.2.1.4）存在于细菌、真菌和动物体内，能够催化纤维素降解，是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再生资源利用等领域的酶制剂。
采用3,5-二硝基水杨酸法测定CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、低温离心机，可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤
1、细菌或细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声冰浴破碎细菌或细胞（功率 200w，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：称取约 0.1g 组织加入 1mL 提取液，冰浴中匀浆。8000g ，4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、标准品稀释表：将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1、0mg/mL。
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序号 |
稀释前浓度（mg/mL） |
标准液体积（µL） |
蒸馏水体积（µL） |
稀释后浓度（mg/mL） |
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1 |
10 |
100 |
900 |
1 |
|
2 |
1 |
160 |
40 |
0.8 |
|
3 |
1 |
120 |
80 |
0.6 |
|
4 |
1 |
80 |
120 |
0.4 |
|
5 |
1 |
40 |
160 |
0.2 |
|
6 |
1 |
20 |
180 |
0.1 |
|
7 |
1 |
0 |
200 |
0 |
实验中每个标准管需50µL标准溶液。
3、加样表（在EP管中依次加入下列试剂）：
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试剂名称（μL） |
对照管 |
测定管 |
标准管 |
|
试剂一 |
50 |
50 |
- |
|
试剂二 |
200 |
200 |
|
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蒸馏水 |
50 |
50 |
- |
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样本 |
|
50 |
- |
|
煮沸的样本 |
50 |
|
- |
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混匀，40℃准确水浴30min，取出后立即放入沸水中煮沸15min，得糖化液 |
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糖化液 |
50 |
50 |
- |
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标准液 |
- |
- |
50 |
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试剂三 |
150 |
150 |
150 |
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混匀， 沸水浴中煮沸显色15min，冷却 |
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蒸馏水 |
1050 |
1050 |
1050 |
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混匀，取 1mL 至玻璃比色皿测定吸光值 A，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管，ΔA 标准=A 标 准-A(0 mg/mL)。标准曲线只需做 1-2 次。 |
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1、标准曲线的建立：
根据标准管的浓度（y，mg/mL）和吸光度
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到
