上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

货号：UPLC-MS-4393	规格：100T/48S	微量法
货号：UPLC-MS-4392	规格：50T/24S	可见分光光度法

产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

溶液的配制：

1、试剂二：临用前加入 3 mL 蒸馏水充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周。

2、试剂三：粉剂置于试剂瓶内 EP 管中。临用前加入 3.5 mL 蒸馏水充分溶解，4℃保存。

3、标准品：临用前加入 1 mL 蒸馏水，配制成 10 mg/mL 的标准溶液。

产品说明：

脱氢抗坏血酸还原酶（Dehydroascorbate reductase，DHAR）是植物体内一种重要的抗氧化酶，是抗坏血酸- 谷胱甘肽氧化循环中促进抗坏血酸再生的关键酶。DHAR 在循环中利用抗坏血酸维持植物体内抗坏血酸的正常代谢水平，保护细胞组分抵御氧化损伤方面发挥着重要作用。

DHAR 催化还原型谷胱甘肽（GSH）还原脱氢抗坏血酸（DHA）生成 AsA，GSH 能和 5,5’-二硫代-双-（2- 硝基苯甲酸）（DTNB）反应产生 2-硝基-5-巯基苯甲酸（TNB）和谷胱甘肽二硫化物（GSSG）。TNB 在波长 412 nm 处具有最大光吸收。通过测定 GSH 的减少速率，计算 DHAR 活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

研钵/匀浆器、冰、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96 孔板、可调式移液器和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1. 组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）1：5-10 的比例（建议称取约 0.1 g 组织，加提取液 1 mL），冰上充分研磨匀浆，8000 g，4℃，离心 10 min，取上清液置于冰上待测。

2. 细菌、细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500-1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声破碎细胞（功率 300w，超声 3s，间隔 7s，总时间 3 min）；然后 8000 g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体：直接检测。