上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-4551 | 规格:100T/48S | 微量法 |
货号:UPLC-MS-4550 | 规格:50T/24S |
可见分光光度法 |
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 10 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂二 |
液体 7 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三 |
液体 13 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂三:临用前根据样本量取出适量的试剂,置于 37℃水浴锅/恒温培养箱中预热 15min。
铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白,有运输铜的功能,同时具有氧化酶的活性,是细胞外液重要的抗氧化剂。 铜蓝蛋白催化 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物,在 645nm 处有特征吸收峰,依此可得铜蓝蛋白活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、蒸馏水。
一、样本处理
血清(浆)直接检测。
二、测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 645nm,分光光度计用蒸馏水调零。
2、 操作表:
试剂名称 |
对照管 |
测定管 |
样本(µL) |
30 |
30 |
试剂一(µL) |
90 |
90 |
试剂二(µL) |
60 |
- |
涡旋混匀,置于 37℃水浴锅/恒温培养箱预热 5min |
||
试剂三(µL) |
120 |
120 |
涡旋混匀,置于 37℃水浴锅/恒温培养箱准确反应 30min |
试剂二(µL) |
- |
60 |
涡旋混匀,室温放置 5min,取 200µL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中。测定 645nm 处吸光值,分别记为 A 对照、A 测定。ΔA=A 测定-A 对照。每个测定管需设一个对照管。 |
A、按微量比色皿计算
单位定义:37℃、1mL 反应体系条件下, 每分钟每 mL 样本与底物作用吸光度升高 0.01 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/mL)=ΔA×(V 反总÷1)÷0.01÷T÷V 样=ΔA÷0.03
单位定义:37℃、1mL 反应体系条件下, 每分钟每 mL 样本与底物作用吸光度升高 0.006 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/mL)=ΔA×(V 反总÷1)÷0.006÷T÷V 样=ΔA÷0.018
T:反应时间,30min;V 样:加入样本体积,0.03mL;V 反总:反应总体积,0.3mL;1:1mL 反应体系条件。
试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性,请操作时做好防护措施。
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