上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

货号：UPLC-MS-4467	规格：100T/96S	微量法
货号：UPLC-MS-4466	规格：50T/48S	可见分光光度法

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

溶液的配制：

1. 提取液：自备 6 mol/L 盐酸。6 mol/L 盐酸的配制：浓盐酸（37%）和 H₂O 的体积比是 1：1。

2. 标准液：0.5 mg/mL 羟脯氨酸标准液。

产品说明：

HYP 是机体胶原蛋白主要成分之一，胶原蛋白大多分布于皮肤、腱、软骨和血管等，因此 HYP 含量是反映胶原组织代谢及纤维化程度的一项重要指标。

样本经酸水解产生游离的 HYP，进一步被氯胺 T 氧化，氧化产物与对二甲氨基苯甲醛反应，产生红色化合物， 在 560nm 处有特征吸收峰。通过测定样本水解液 560nm 吸光值，可计算 HYP 含量。

技术指标：

最低检出限：0.051 μg/mL

线性范围：0.117-7.5 μg/mL

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

天平、玻璃管、离心机、水浴锅、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、6mol/L 盐酸和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1、组织：称取约 0.2g 样本于玻璃管，将组织尽量剪碎以便消化，盖子稍松不密闭。加入 2mL 的提取液，煮沸或 110℃ 烘箱 2 至 6 小时消化至没有可见大的团块，冷却后用 10mol/L NaOH（约 1mL）调节 pH 值至 6-8 范围内（不可过酸或过碱），再蒸馏水定容至 4mL。最后 16000rpm，25℃，离心 20min（若离心后仍有杂质，可通过过滤去除），

取上清待测。（过程中可能有黑色物质生成，若长时间不能消化，可能为碳化的物质，不影响实验）

2. 细胞：取 500 万个细胞，加入 1mL 的提取液，煮沸或 110℃烘箱 2 至 6 小时消化至透明状，冷却后用 10mol/L NaOH（约 0.5mL）调节 pH 值至 6-8 范围内（不可过酸或过碱），蒸馏水定容至 2mL，16000rpm，25℃，离心 20min，取上清待测。