尿酸(UA)含量检测试剂盒-尿酸(UA)检测试剂盒-上海液质



上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化elisa土壤植物细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测Elisa代测HPLC 检测GC检测GC-MS 检测LC-MS检测ICP-MS检测 、土壤植物动物成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购


货号:UPLC-MS-4557 规格:100T/48S 微量法
货号:UPLC-MS-4556 规格:50T/24S 可见分光光度法

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

提取液

液体 50 mL×1

2-8℃保存

试剂一

液体 80 mL×1

2-8℃保存

试剂二

粉剂×2

2-8℃保存

试剂三

粉剂×1

2-8℃保存

试剂四

粉剂×1

2-8℃保存

试剂五

粉剂×1

-20℃保存

试剂六

粉剂×1

-20℃保存

标准品

液体 1mL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1 试剂二:临用前加入 6 mL 试剂一,充分混匀后备用;用不完的试剂 2-8℃保存 1 周。

2 试剂三:临用前加入 12 mL 试剂一,充分混匀后备用;用不完的试剂 2-8℃保存 4 周。

3 试剂四:临用前加入 12 mL 试剂一,充分混匀后备用;用不完的试剂 2-8℃保存 4 周。

4 试剂五:粉剂置于试剂瓶内玻璃管中。临用前加入 12 mL 试剂一,充分混匀后备用;用不完的试剂-20℃ 分装保存,避免反复冻融。-20℃可保存 4 周。

5 试剂六:粉剂置于试剂瓶内玻璃管中。临用前加入 12 mL 试剂一,充分混匀后备用;用不完的试剂-20℃ 保分装保存,避免反复冻融。-20℃可保存 4 周。

6 标准品:5 µmol/mL 尿酸溶液。

7 工作液 A 的配制:用于样本测定管、空白管及标准管的检测,按照试剂二:试剂三:试剂四:试剂五: 试剂六=1:1:1:1:2 的比例配制,根据样本量现配现用,配后建议 2 小时内用完。

8 工作液 B 的配制:用于样本对照管的检测,按照试剂二:试剂三:试剂四:试剂五:试剂一=1:1:1:1:2 的比例配制,根据样本量现配现用,配后建议 2 小时内用完。

产品说明:

尿酸为嘌呤代谢的终末产物,嘌呤代谢紊乱、能量代谢异常及肾脏对尿酸的排泄障碍等均可引起血浆尿酸水平升高或降低,进而导致多种疾病如通风、肾病、心血管疾病的发生,尿酸含量的测定在临床诊断中有着重要的指导意义。

尿酸酶催化尿酸分解为尿囊素、CO2H2O2H2O2氧化亚铁氰化钾中的Fe2+生成Fe3+Fe3+进一步与4-氨基安替比林和酚反应生成红色醌类化合物,在505nm处有特征吸收峰,通过测定505nm处的吸光值来计算尿酸的含量。

技术指标:

最低检出限:0.0032 μmol/mL

线性范围:0.003906-0.25 μmol/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、蒸馏水、   冰、EP管。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

组织:按照组织质量(g)︰提取液体积(mL) 1︰5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液) 进行冰浴匀浆,然后 10000rpm,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。

血清(浆)或尿液:直接检测。若溶液有浑浊则离心后取上清进行测定。

 二、测定步骤

1. 分光光度计预热30min以上,调节波长至505nm,蒸馏水调零。

2. 标准溶液的制备:将5µmol/mL标准液用蒸馏水稀释为0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078µmol/mL 的标准溶液备用,备注:实验中每个标准管需 250µL 标准溶液。

3. 操作表:(在1.5 mL离心管中)

试剂名称(µL

对照管

测定管

标准管

空白管

样本

250

250

-

-

标准溶液

-

-

250

-

蒸馏水

-

-

-

250

工作液A

-

750

750

750

工作液B

750

-

-

-

三、UA 含量计算

1. 标准曲线的绘制:

根据标准管的浓度(x,μmol/mL)和吸光度ΔA标准(y,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA 测定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,μmol/mL)。

2. UA含量的计算:

       (1) 按样本质量计算

UA含量(µg/g 质量)=x×V提取÷W×M=168x÷W

(2) 按液体体积计算

UA含量(µg/mL 血清(浆)或尿液)=x×V样÷V样×M=168x

V提取:提取液体积,1mL;W:样本质量,g;M:尿酸分子质量,168;V样:加入的样本体积,0.25mL。

注意事项:

1 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。注意同步修改计算公式。

2、工作液A与工作液B,需根据样本量现配现用,配后建议2小时内用完。工作液本身为淡黄色,如有变色,则视    为失效,需重新配制。


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