上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-5143 | 规格:100T/48S | 微量法 |
货号:UPLC-MS-4519 | 规格:50T/24S |
可见分光光度法 |
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
粉剂×2 瓶 |
4℃保存 |
试剂二 |
液体 15 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂三 A 液 |
液体 3 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂三 B 液 |
液体 12 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂四 |
液体 10 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
标准品 |
粉剂×1 支 |
4℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:临用前加 5mL 蒸馏水充分溶解,现用现配,4℃可保存一周。
2、 试剂三:临用前将 A 液倒入 B 液中混合,或者根据比例(A:B=1:4)现用现配。
3、 标准品:10 mg 尿素。临用前加入 4.66 mL 蒸馏水配制成 1 mg/mL 尿素氮标准液。
尿素(BUN)是人体蛋白质代谢的主要终末产物,BUN构成了血液中绝大部分的非蛋白质氮,血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N,生成的蓝色靛酚和尿素氮的浓度成正比。
最低检出限:0.00009 μg/mL
线性范围:0.78125-100 μg/mL
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、天平、研钵/匀浆器、低温离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
组织:按照质量(g)﹕蒸馏水体积(mL)为 1﹕5-10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 蒸馏水),冰上匀浆后于 4℃,13000g 离心 15min,取上清待测。
细菌或细胞:按照细胞数量(104 个)﹕蒸馏水体积(mL)为 500-1000﹕1 的比例(建议 500 万个细胞加入 1mL 蒸馏水),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3s,间隔 7s,总时间 3min);然后 4℃,13000g 离心 15min,取上清置于冰上待测。
血清(浆)或其它液体:直接检测。
试剂名称(μL) |
空白管 |
标准管 |
测定管 |
对照管 |
样本 |
|
|
30 |
30 |
标准品 |
|
30 |
|
- |
蒸馏水 |
30 |
|
|
60 |
试剂一 |
60 |
60 |
60 |
- |
试剂二 |
110 |
110 |
110 |
110 |
充分混匀,于37℃反应10min |
||||
试剂三 |
120 |
120 |
120 |
120 |
试剂四 |
90 |
90 |
90 |
90 |
充分混匀,37℃静置30min |
||||
蒸馏水 |
90 |
90 |
90 |
90 |
充分混匀后,从上述反应液中吸取 200μL 于 96 孔板/微量玻璃比色皿中测定 630nm 处吸光值,记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管和 A 对照管。计算 ΔA 标准=A 标准管-A 空白管,ΔA 测定=A 测定管-A 对照管。 |
尿素氮含量(μg/g 质量)=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷W=25×ΔA测定÷ΔA标准÷W
2. 按蛋白浓度计算:
尿素氮含量(μg/mg prot)=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷(Cpr×V提取)=25×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr
3. 按细胞数量计算:
尿素氮含量(μg/104 cell)=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品×V提取÷细胞数量=25×ΔA测定÷ΔA标准÷细胞数量
4. 按液体体积计算:
尿素氮含量(μg/mL)=ΔA测定÷ΔA标准×C标准品=25×ΔA测定÷ΔA标准
C标准品:标准品浓度,25μg/mL;V提取:提取液体积,1mL;W:样本质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL; 细胞数量:以万计。
如果样本吸光值大于 1.5,建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到