上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-4613 | 规格:100T/96S | 微量法 |
货号:UPLC-MS-4612 | 规格:50T/24S |
可见分光光度法 |
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
提取液一 |
液体 60mL×1 瓶 |
4℃保存 |
提取液二 |
液体 10mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂一 |
液体 25mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂二 |
液体 25mL×1 瓶 |
4℃保存 |
产品说明:
硫化氢(H2S)是一种新型气态信号分子,存在于脑内的神经递质,生理浓度的 H2S 对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用,并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。其在植物中也具有促进种子萌发、调节植物气孔、增强光合作用等作用,同时还会影响植物体内的氧化还原平衡和物质代谢。
H2S 与N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝,亚甲基蓝在 665nm 处有最大吸收峰,通过测定其吸光值可计算H2S 含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、低温离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
1. 细菌或培养细胞样本:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃培养液上清,按照细菌或细胞数量(104 个): 提取液一体积(mL)=500-1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 7s,总时间 3min),12000g 4℃离心 10min;然后取 0.8mL 上清液, 再加入 0.15mL 提取液二,漩涡震荡 30s,12000g 4℃离心 10min,取上清置于冰上待测。
2. 组织样本:按照组织质量(g):提取液一体积(mL)为 1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液一),进行冰浴匀浆;12000g 4℃离心 10min;然后取 0.8mL 上清液,再加入 0.15mL 提取液二,漩涡震荡 30s,12000g 4℃离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 血清(浆)或其它液体样本:取 100μL 血清(浆)或其它液体加入 1mL 提取液一,12000g 4℃离心 10min; 然后取 0.8mL 上清液,再加入 0.15mL 提取液二,漩涡震荡 30s,12000g 4℃离心 10min,取上清置于冰上待测。
试剂名称(μL) |
测定管 |
空白管 |
样 本 |
250 |
- |
蒸馏水 |
- |
250 |
试剂一 |
375 |
375 |
试剂二 |
375 |
375 |
标准曲线回归方程 y = 0.0026x-0.0268(其中 ΔA 为纵坐标 y,标准溶液浓为横坐标 x),将 ΔA 带入公式中得到 x(nmol/mL)。
1、按照样本质量计算
H2S 含量(nmol/g 质量)= x×(V 上清+V 提取液二)÷(W×V 上清÷V 提取液一)=1.1875×x÷W
2、按照细胞数量计算
H2S 含量(nmol/104 cell)= x×(V 上清+V 提取液二)÷(细胞数量×V 上清÷V 提取液一)= 1.1875×x ÷细胞数量
3、按照液体体积计算
H2S 含量(nmol/mL)= x×(V 上清+V 提取液二)÷[V 液体×V 上清÷(V 提取液一+V 液体)]= 13.0625×x
V 上清:提取时上清液的体积:0.8mL;V 提取液一:加入提取液一的体积:1mL;V 提取液二:加入提取液二的体积:0.15mL;V 样本:反应液中加入样本的体积,0.25mL;V 液体:提取时液体体积,0.1mL;W:样本质量,g;细胞数量:以万计。
1、如果 ΔA 值过低或接近空白值,建议增加样本量(增大样本质量提取)后再进行测定;如果ΔA>0.6,建议稀释样本后再进行测定,计算公式中要乘以相应的稀释倍数。
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