上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

溶液的配制：

1、 试剂二：临用前加 10 mL 蒸馏水充分溶解。4℃可以保存 1 周。（由于试剂稳定性较差，故多给一瓶）

2、 试剂三：临用前根据样本量取适量试剂三用蒸馏水稀释 100 倍使用即可。

产品说明：

APX 是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一，也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。APX 具有多种同功酶，分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体，以及过氧化体和类囊体膜上。APX 催化 H₂O₂ 氧化 AsA， 是植物 AsA 的主要消耗者。APX 的活性直接影响到 AsA 的含量，APX 与 AsA 具有一定的负相关性。

APX 催化 H₂O₂ 氧化 AsA，通过测定 AsA 氧化速率，来计算得 APX 活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、低温离心机、移液枪、水浴锅、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一）进行冰浴匀浆。13000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测

二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长到 290nm，用蒸馏水调零。

2. 试剂一在 25℃中预热 30min 以上。

3. 空白管：依次在微量石英比色皿/96 孔 UV 板中加入 20μL 蒸馏水、140μL 预热的试剂一、20μL 试剂二和 20μL试剂三，迅速混匀后在 290nm 测定 10s 和 130s 的吸光度 A1 和 A2，ΔA 空白管=A1-A2。

4. 测定管：依次在微量石英比色皿/96 孔 UV 板中加入 20μL 上清液、140μL 预热的试剂一、20μL 试剂二和 20μL试剂三，迅速混匀后在 290nm 测定 10s 和 130s 的吸光度 A3 和 A4，ΔA 测定管=A3-A4。

三、APX 活性计算

a. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

         （1） 按蛋白浓度计算