上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

溶液的配制：

1、 试剂二：临用前每支加入 1mL 试剂四溶解，溶解后的试剂在-20℃分装保存，可以保存 4 周。

2、 标准品：5mmol/L 的对硝基苯酚标准液。

产品说明：

α-man 分布广泛、种类繁多，在真核生物胞质、内质网、高尔基体、溶酶体中都有发现，不同种类、功能的 α-man共同参与N-聚糖的修饰过程。

α-man 和特定底物发生反应，其生成物在 405nm 处有特征吸收峰，根据吸光度的变化率可计算出 α-man 活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、匀浆器/研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：

        一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1、组织：按照组织质量（g）︰提取液体积(mL)为 1︰5~10 的比例（建议称取约 0.1 g 组织，加入 1 mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后 12000 g，4℃，离心 10 min，取上清置于冰上待测。

2、细胞或细菌：先收集细胞或细菌到离心管内，离心后弃上清；按照细胞或细菌数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000︰1 的比例（建议 500 万个细胞或细菌加入 1 mL 提取液）进行提取，冰浴超声波破碎细胞或细菌（功率 200 W，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3 min）；然后 12000 g，4℃，离心 10 min，取上清置于冰上待测。

3、液体：直接检测。若有浑浊可以离心后测定

二、测定步骤

1、 分光光度计预热 30 min 以上，调节波长至 405 nm，蒸馏水调零。

2、 将 5mmol/L 的对硝基苯酚标准液用蒸馏水稀释为 0.3125、0.15625、0.078、0.039、0.0195、0.01、0.005mmol/L的标准溶液备用。

3、 操作表：(在 1.5 mL 离心管中)