上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆，然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后 10000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

血清等液体：直接检测。

二、测定步骤

1、 紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。

2、 操作表：

三、UGP 酶活计算

1. 按照样本蛋白浓度计算

酶活单位定义：每毫克组织蛋白每分钟产生1nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。

UGP（U/mg prot）=[ΔA÷（ε×d）×V 反总×10 9]÷(V 样×Cpr) ÷T=321.54×ΔA÷Cpr

2. 按照样本质量计算

酶活单位定义：每克组织每分钟产生1nmol 的NADPH定义为一个酶活力单位。

UGP（U/g 质量）=[ΔA÷（ε×d）×V 反总×10 9]÷(W ×V 样÷V 样总) ÷T=321.54×ΔA÷W

3. 按照细胞数量计算

酶活单位定义：每104个细胞每分钟产生1nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。

UGP（U/104 cell）=[ΔA÷（ε×d）×V 反总×10 9]÷(500×V 样÷V 样总) ÷T=0.643×ΔA

4. 按照液体体积计算

酶活单位定义：每毫升液体每分钟产生1nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。

UGP（U/mL）=[ΔA÷（ε×d）×V 反总×10 9]÷V 样÷T=321.54×ΔA

V反总：反应体系总体积，1×10 -3L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×10 3L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 样：加入样本体积，0.1mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，5min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL； W：样本质量，g ；500：细胞或细菌总数，500万

109：单位换算系数，1mol=109nmol。

注意事项

1. 空白管为检测各试剂组分质量的检测孔，正常情况下，变化不超过0.01。

2. ΔA大于0.6或者A2测定大于1.2时，建议将样本稀释后再进行测定。当ΔA小于0.01时，可以延长反应时间（5min或10min）来测定。