货号:UPLC-MS-4119 | 规格:100T/96S | 微量法 |
货号:UPLC-MS-4118 | 规格:50T/48S | 可见分光光度法 |
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
提取液一 |
液体 60 mL×1 瓶 |
常温保存 |
提取液二 |
液体 60 mL×1 瓶 |
常温保存 |
试剂一 |
液体 100 mL×1 瓶(自备) |
4℃保存 |
试剂二 |
液体 10 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
标准品 |
粉剂×1 支 |
4℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:80%乙醇自备;
2、 标准品:10 mg D-木糖。临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解配制成 10 mg/mL 的标准溶液。
半纤维素是指在植物细胞壁中与纤维素共生、可溶于碱溶液,遇酸后远较纤维素易于水解的那部分植物多糖, 广泛存在于植物中,其分布因植物种属、成熟程度、早晚材、细胞类型及其形态学部位的不同而有很大差异。一种植物往往含有几种由两或三种糖基构成的半纤维素,其化学结构各不相同。半纤维素是一种新型的可利用能源。
最低检出限:0.1516 mg/mL
线性范围:0.2-1 mg/mL
需自备的仪器和用品:
天平、可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、恒温水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵、30~50 目筛、蒸馏水、EP管。
样本自然风干或用烘箱烘干至恒重,研钵充分研磨后,过 30~50 目筛。
1、 分光光度计/酶标仪预热30 min以上,调节波长至540 nm,蒸馏水调零。
2、 将标准品用蒸馏水稀释至1、0.9、0.8、0.6、0.4、0.2 mg/mL标准液。
3、 操作表(在1.5 mL EP管中操作):
试剂名称 |
空白管 |
测定管 |
标准管 |
样本(g) |
|
0.05 |
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试剂一(μL) |
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1000 |
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漩涡混匀,90℃水浴10 min,25℃,8000 g离心10 min,弃上清留沉淀 |
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蒸馏水(μL) |
|
1000 |
|
漩涡混匀,25℃,8000 g离心10 min,弃上清,此步骤重复三次,取沉淀,烘干至恒重 |
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提取液一(μL) |
500 |
500 |
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90℃水浴1 h,自然冷却至室温 |
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提取液二(μL) |
500 |
500 |
|
漩涡混匀,25℃,8000 g离心10 min,取上清待测 |
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上清液(μL) |
80 |
80 |
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标准液(μL) |
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|
80 |
试剂二(μL) |
80 |
80 |
80 |
蒸馏水(μL) |
160 |
160 |
160 |
漩涡混匀,90℃水浴5 min,自然冷却至室温 |
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取 200 μL 反应液于微量玻璃比色皿/96 孔板中,在 540 nm 下测定吸光值 A,分别记为 A 标准、A 测定、A 空白,计算 ΔA 标准=A 标准-A 空白,ΔA 测定=A 测定-A 空白。(空白管只需测定 1-2 次) |
1、标准曲线的绘制:
以各个标准溶液的浓度为x轴,其对应的ΔA标准为y轴,绘制标准曲线,得到标准方程y= kx+b,将ΔA带入方程得到x(mg/mL)。
2、半纤维素含量的计算:
半纤维素含量(mg/g 干重)= x× V样总÷W×F= x÷ W×F
V样总:加入提取液体积,1 mL;W:样本质量,g;F:稀释倍数。
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