半纤维素含量检测试剂盒--半纤维素检测试剂盒



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货号:UPLC-MS-4119 规格:100T/96S 微量法
货号:UPLC-MS-4118 规格:50T/48S 可见分光光度法

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

提取液一

液体 60 mL×1

常温保存

提取液二

液体 60 mL×1

常温保存

试剂一

液体 100 mL×1 瓶(自备)

4℃保存

试剂二

液体 10 mL×1

4℃保存

标准品

粉剂×1

4℃保存

溶液的配制:

1 试剂一:80%乙醇自备;

2 标准品:10 mg D-木糖。临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解配制成 10 mg/mL 的标准溶液。

产品说明:

半纤维素是指在植物细胞壁中与纤维素共生、可溶于碱溶液,遇酸后远较纤维素易于水解的那部分植物多糖, 广泛存在于植物中,其分布因植物种属、成熟程度、早晚材、细胞类型及其形态学部位的不同而有很大差异。一种植物往往含有几种由两或三种糖基构成的半纤维素,其化学结构各不相同。半纤维素是一种新型的可利用能源。

技术指标:

最低检出限:0.1516 mg/mL

线性范围:0.2-1 mg/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

天平、可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、恒温水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵、30~50 目筛、蒸馏水、EP管。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

样本自然风干或用烘箱烘干至恒重,研钵充分研磨后,过 30~50 目筛。

二、测定步骤

1 分光光度计/酶标仪预热30 min以上,调节波长至540 nm,蒸馏水调零。

2 将标准品用蒸馏水稀释至1、0.9、0.8、0.6、0.4、0.2 mg/mL标准液。

3 操作表(在1.5 mL EP管中操作):


试剂名称

空白管

测定管

标准管

样本(g

 

0.05

 

试剂一(μL

 

1000

 

漩涡混匀,90℃水浴10 min25℃8000 g离心10 min,弃上清留沉淀

蒸馏水(μL

 

1000

 

漩涡混匀,25℃8000 g离心10 min,弃上清,此步骤重复三次,取沉淀,烘干至恒重

提取液一(μL

500

500

 

90℃水浴1 h,自然冷却至室温

提取液二(μL

500

500

 

漩涡混匀,25℃8000 g离心10 min,取上清待测

上清液(μL

80

80

 

标准液(μL

 

 

80

试剂二(μL

80

80

80

蒸馏水(μL

160

160

160

漩涡混匀,90℃水浴5 min,自然冷却至室温

200 μL 反应液于微量玻璃比色皿/96 孔板中,在 540 nm 下测定吸光值 A,分别记为 A 标准、A

测定、A 空白,计算 ΔA 标准=A 标准-A 空白,ΔA 测定=A 测定-A 空白。(空白管只需测定 1-2 次)

三、半纤维素含量计算

1、标准曲线的绘制:

以各个标准溶液的浓度为x轴,其对应的ΔA标准为y轴,绘制标准曲线,得到标准方程y= kx+b,将ΔA带入方程得到x(mg/mL)。

2、半纤维素含量的计算:

半纤维素含量(mg/g 干重)= x× V样总÷W×F= x÷ W×F

V样总:加入提取液体积,1 mL;W:样本质量,g;F:稀释倍数。

四、注意事项:

1 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

2 建议将加入提取液二离心后的上清液稀释10~20倍后检测。计算公式中注意乘以稀释倍数。


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