上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

货号：UPLC-MS-4436

规格：50T/48S

紫外分光光度法

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

溶液的配制：

1、 试剂三：临用前加入 55 mL 试剂一；

2、 试剂四：临用前加入 3.5 mL 试剂二；

3、 标准品液：10 μmol/mL 谷氨酸标准品。

产品说明：

Glu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一，而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。此外，Glu还是味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。

谷氨酸脱氢酶（GDH）催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH +，引起340nm处吸光度的上升，通过测定340nm吸光度的变化，计算谷氨酸含量。

技术指标：

最低检出限：0.023 μmol/mL

线性范围： 0.025-0.5 μmol/mL

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

细菌、细胞：收集细胞或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 1000 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率 20%，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），10000rpm，常温离心 10min，取上清待测。

组织样本：称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆，10000rpm，常温离心 10min，取上清待测。

二、测定步骤

1. 紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。

2. 标准溶液的制备：将标准品分别稀释为0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.05、0.025μmol/mL的标准溶液。

3. 在1mL石英比色皿中加入下列试剂：

(1) 标准管：在1mL石英比色皿中加入200μL标准溶液、800μL试剂三和50μL试剂四混匀，立即记录340nm处20s时的吸光值为A1和5min20s时的吸光值A2，计算∆A标准=A2-A1。

(2) 测定管：在1mL石英比色皿中加入200μL样本、800μL试剂三和50μL试剂四混匀，立即记录340nm处20s时的吸光值为A1和5min20s时的吸光值A2，计算∆A =A2-A1。