植物硝态氮含量检测试剂盒



产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

试剂一

粉剂×2

4℃保存

试剂二

液体 50 mL×1

4℃保存

标准品

粉剂×1

4℃保存

溶液的配制:

1 试剂一:临用前根据用量每支加入 0.5 mL 浓硫酸充分溶解。配制好后尽快使用,4℃可保存一周。

2 标准品:10 mg 硝酸钾,临用前加入 0.935 mL 蒸馏水溶解,配成 1400 μg/mL NO3-N 标准液。

产品说明:

硝酸盐是植物吸收的主要含氮物质之一。硝酸盐在植物体内的还原部位不同,可以在根内,也可以在枝叶内进行,且因植物类别和环境条件而异。因此,测定植物体内硝态氮含量变化对了解氮代谢机制有重要的意义。

在浓酸条件下,NO -可以与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,后者在PH>12的条件下呈黄色,在一定范围内, 其颜色深浅与含量成正比,可比色测定计算得硝态氮含量。

技术指标:

最低检出限:0.4631 μg/mL

线性范围:3.5-140 μg/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、浓硫酸、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

按照质量(g):蒸馏水体积(mL) 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 样本,加入 1mL 蒸馏水)加入蒸馏水, 室温匀浆后置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min,期间不断晃动或者置于 90℃恒温摇床中振荡提取 30min,待冷却后于 25℃,12000g 离心 15min,取上清待测。

二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至410nm,分光光度计蒸馏水调零。

2. 将1400μg/mL NO3-N标准液用蒸馏水50倍稀释成28μg/mL的标准溶液。

3. 操作表:


试剂名称

测定管

对照管

标准管

空白管

样本(μL

8

8

 

 

标准溶液(μL

 

 

8

 

蒸馏水(μL

 

12

 

8

试剂一(μL

12

-

12

12

充分混匀,25℃静置30min

试剂二(μL

280

280

280

280

混匀,涡旋振荡,使出现的沉淀充分溶解,取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板中测定 410nm 处吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。

三、植物 NO3-N 的计算

1. 按样本质量计算

NO - N含量(μg/g 质量)=ΔA÷(ΔA标准÷C标准)×V提取÷W=28×ΔA÷ΔA标准÷W

2. 按样本蛋白浓度计算

NO - N含量(μg/mg prot)=ΔA÷(ΔA标准÷C标准)×V提取÷(Cpr×V提取)=28×ΔA÷ΔA标准÷Cpr

W:样本质量,g;C标准:标准溶液浓度,28μg/mL;V提取:样本总体积,0.3mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL。

注意事项:

1 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性,操作时需做好防护措施。

2 如果样本吸光值大于 1.5,建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。


上一篇:植物脱氢酶(PDHA)活性检测试剂盒-植物试剂盒-脱氢酶试剂盒
下一篇:植物叶绿素含量检测试剂盒

独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到

咨询热线
400-998-2324
欢迎关注官方微信
版权所有:上海液质检测技术有限公司    网站备案号:沪ICP备2022005945号
400-998-2324
0.073748s