上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

货 号 ：UPLC-MS-4267                    规 格：100T/96S                              微量法

货号：UPLC-MS-4266                       规格：50T/48S                                  可见分光光度法

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

溶液的配制：

1、 提取液：自备无水乙醇和丙酮，将无水乙醇：丙酮（V：V）=1:2 混合待用，提供一个 125mL 空瓶。

产品说明：

植物叶绿素广泛存在于绿色植物组织中，是光合作用的细胞器。其含量与光合作用、营养状况密切相关，是反应植物生长状况的重要指标。

叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有最大吸收，根据经验公式可计算得叶绿素a和叶绿素b以及总叶绿素的含量。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者

增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板（建议使用非聚苯乙烯材质的96孔板）、可调式移液枪、天平、研钵/匀浆器、锡箔纸、蒸馏水、10mL试管、无水乙醇和丙酮。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1. 取新鲜植物叶片或其它绿色组织，用蒸馏水洗干净，然后吸干表面水分，去掉中脉，称取约 0.1g，剪碎放入研钵或匀浆器中。

2. 加入 1mL 蒸馏水，少量试剂一（约 10mg），在黑暗或弱光条件下充分研磨，转入 10mL 试管中。

3. 用提取液冲洗研钵，将所有冲洗液转入 10mL 试管中，用提取液定容至 10mL，置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提 3h，观察底部组织残渣颜色接近于白色则提取完全，若组织残渣未完全变白，继续浸提至组织残渣颜色接近于白色。

二、测定步骤

1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至645nm和663nm，分光光度计用提取液调零。

2、 取上层浸提液200μL于微量玻璃比色皿/96孔板中（若使用聚苯乙烯材质的96孔板，请在5min内尽快测定完成）， 测定663nm和645nm处吸光值，分别记为A₆₆₃和A₆₄₅。

三、叶绿素的计算

叶绿素a含量（mg/g 质量）=（21.2×A₆₆₃-4.48×A₆₄₅）×V提×F÷W÷1000 = 0.01×（21.2×A₆₆₃-4.48×A₆₄₅）×F÷W

叶绿素b含量（mg/g 质量）=（38.2×A₆₄₅-7.8×A₆₆₃）×V提×F÷W÷1000 = 0.01×（38.2×A₆₄₅-7.8×A₆₆₃）×F÷W