上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
提取液 |
液体 100 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂一 |
粉剂 10mg×1 支 |
4℃保存 |
试剂二 |
液体 2.5mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂三 |
液体 40 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂四 |
液体 10 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂五 |
粉剂 0.5g×1 瓶 |
常温保存 |
溶液的配制:
试剂一:临用前加1mL蒸馏水溶解,用水稀释10倍,备用,即1mg/mL。
蔗糖是植物光合作用的主要产物,也是糖分运输和储藏的主要形式。因此,测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。此外,蔗糖含量是饮料﹑蜂蜜、果脯﹑糖果和乳制品等产品质量控制的重要指标之一。先用碱与样本共热,破坏其中的还原糖。然后在酸性条件下将蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖进一步与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm 下有特征吸收峰。
最低检出限:0.0148 mg/mL
线性范围:0.0195-6 mg/mL
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
称取0.1~0.2g 样本,常温研碎,加入1mL 提取液,适当研磨后快速转移到离心管中,置于80℃水浴锅中10min, 振荡3~5 次,冷却后,4000g,25℃离心10min,取上清,加入2mg试剂五,80℃脱色30min,再加入1mL 提取液,4000g, 25℃离心10min,取上清液测定。
1、 可见分光光度计预热30min 以上,调节波长至480nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂):
试剂(μL) |
空白管 |
标准管 |
测定管 |
样本 |
|
|
100 |
试剂一 |
|
100 |
|
蒸馏水 |
100 |
|
|
试剂二 |
50 |
50 |
50 |
混匀,沸水浴煮沸5min 左右(盖紧,防止水分散失) |
|||
试剂三 |
700 |
700 |
700 |
试剂四 |
200 |
200 |
200 |
混匀,沸水浴 10min,冷却后测定 480nm 处吸光值,空白管、标准管和测定管分别记为 A1、A2 和 A3。
1、 按照样本蛋白浓度计算
蔗糖含量 (mg/mg prot) = (C 标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr
此法需要自行测定蛋白浓度。
2、按照样本质量计算
蔗糖含量 (mg/g 质量) = (C 标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2) = 2×(A3-A1)÷(A2-A1)÷W
C 标准管:标准管浓度,1mg/mL;V1:加入样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,2mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
当样本吸光值大于 1.1 时,建议将样本用提取液稀释后进行测定。
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