土壤铵态氮含量检测试剂盒



产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

提取液

液体 100 mL×1

-20℃保存

试剂一 A

液体 1 mL×1

2-8℃保存

试剂一 B

液体 4 mL×1

2-8℃保存

试剂二

液体 2.5 mL×1

2-8℃保存

标准品

液体 1 mL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1 试剂一:临用前将试剂一 A 加入试剂一 B 中混匀备用,或按比例现用现配;避光 2-8℃可保存 2 周。若变色则不能继续使用。

2 标准品:100 μg/mL NH +-N 标准液。

 

产品说明:

土壤铵态氮是土壤速效氮的重要组成部分,可以被植物直接吸收利用。铵态氮指标对农业生产具有极其重要的作用。

在强碱介质中,土壤中的铵态氮与次氯酸盐和苯酚作用,生成靛酚蓝染料,在630nm处有特征吸收峰,吸光值与铵态氮含量成正比。

技术指标:

最低检出限:0.1314 μg/mL

线性范围:0.15625-18 μg/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、振荡器、30~50目筛、研钵、恒温水浴锅。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)


按照土样质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 新鲜土样,加入 1mL 提取液),振荡提取 1h,10000g,25℃离心 10min,取上清液待测。土样要求参考注意事项 1.2.

二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至630nm,分光光度计蒸馏水调零。

 

2. 标准液稀释:临用前取20μL 100μg/mL氮标准液,加入780μL蒸馏水,充分混匀,配制成2.5μg/mL标准液使用, 现用现配。(实验中每管需要120μL,为减小实验误差,故配制大体积。)

3. 加样表:

试剂名称(μL

空白管

标准管

测定管

样本

-

-

120

蒸馏水

120

-

-

标准品

-

120

-

试剂一

24

24

24

试剂二

18

18

18

充分混匀,于室温25℃放置30min

蒸馏水

138

138

138

充分混匀后吸取 200μL 于微量玻璃比色皿或 96 孔板中,测定 630nm 处吸光值,记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管。计算ΔA 标准=A 标准管-A 空白管,ΔA 测定=A 测定管-A 空白管。标准管和空白管只需测 1-2 次。

三、计算公式

NH +-N(μg/g 土样)=ΔA测定÷ΔA标准×C标准液×V提取÷W=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W C标准液:标准液浓度,2.5μg/mL;V提取:提取液体积,1mL;W:样本质量,g。

注意事项:

1 土壤经风干或者烘干很容易引起铵态氮的变化,所以建议采用新鲜土壤进行测定。样品采集后应于 4℃下密封运输和保存,并在 3d 内分析完毕。否则,应于-20℃(深度冷冻)下以小块、小份保存,样品中氨氮可以保存数周。当测定深度冷冻氨氮含量时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在 4 h 内完成样品解冻、匀质化和提取;如果在 4℃下解冻,解冻时间不应超过 48 h。

2 如果要比较不同样本间的铵态氮含量,需将土样烘干,按干重计算后再进行比较。

3 如果样本吸光值大于 1.4,建议将样本用提取液稀释后进行测定

 


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