土壤淀粉酶(S-AL)活性检测试剂盒



产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 10 mL×1

2-8℃保存

试剂二

粉剂×1

2-8℃保存

试剂三

液体 20 mL×1

2-8℃保存

标准品

粉剂×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1 试剂二:临用前取 1 瓶加入 5 mL 蒸馏水,置于常温水中并加热至煮沸,期间不断搅拌或震荡至粉剂溶解, 用不完的试剂 2-8℃保存一周。

2、标准品:10 mg 麦芽糖。临用前加入 1.38 mL 蒸馏水配制成 20 μmol/mL 的储备液,2-8℃保存两周。

产品说明:

淀粉酶(EC3.2.1.1)是催化淀粉水解的一类酶的总称。土壤中的淀粉酶主要来自于微生物,是一种重要的酶制剂,广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。

淀粉酶水解淀粉产生还原糖,可与 3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质,在 540nm 处有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

天平、恒温培养箱/水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、30~50目筛、研   钵、甲苯(不允许快递)。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30~50 目筛。

二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至540nm,分光光度计用蒸馏水调零。

2. 将20μmol/mL的麦芽糖储备液用蒸馏水稀释为 2、1、0.8、0.6、0.4μmol/mL的标准溶液备用。

3. 标准品浓度稀释表

序号

稀释前浓度(µmol/mL

标准液体积(µL

蒸馏水体积(µL

稀释后浓度(µmol/mL

1

20

100

900

2

2

2

500

500

1

3

1

400

100

0.8

4

1

300

200

0.6

5

1

200

300

0.4

备注:实验中每个标准管需60µL标准溶液。

4. 操作表:

试剂名称

测定管

对照管

标准管

空白管

土样(g

0.05

0.05

-

-

甲苯(μL

10

10

-

-

蒸馏水(μL

-

100

 

 

试剂一(μL

100

100

-

-

试剂二(μL

100

-

-

-

充分震荡混匀, 37℃水浴或37℃恒温箱培养24h 之后

12000rpm,常温离心10min,取上清。

 

-

 

-

上清液(μL

60

60

-

-

蒸馏水(μL

-

-

-

60

标准溶液(μL

-

-

60

土壤铵态氮含量检测试剂盒

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