上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货 号 :UPLC-MS-4029 规 格:100T/48S 微量法
货号:UPLC-MS-4028 规格:50T/24S 可见分光光度法
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 2 mL×1 瓶(自备) |
2-8℃保存 |
试剂二 |
液体 10 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三 |
粉剂×2 瓶 |
-20℃保存 |
试剂四 |
液体 30 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
标准品 |
液体 1 mL×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:甲苯自备。
2、 试剂三:临用前取 1 瓶加入 5 mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存 4 周;
3、 标准品:5 mmol/L 的对硝基苯酚溶液。
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37,β-XYS)于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶, 产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。
S-β-XYS催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在400nm处有特征吸收峰,测定400nm光吸收增加速率,可计算S-β-XYS活性。
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、30-50 目筛、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
1、 分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至400nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、 标准溶液的稀释:临用前取20μL 5 mmol/L的对硝基苯酚溶液,加入980μL试剂二,充分混匀,配制成100 μmol/L标准液使用,现用现配。(实验中每管需要100μL,为减小实验误差,故配制大体积。)
3、 加样表:
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
风干土样(g) |
0.02 |
0.02 |
- |
- |
试剂一(μL) |
5 |
5 |
- |
- |
振荡混匀,使土样全部潮湿,室温放置15min |
- |
- |
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试剂二(μL) |
100 |
100 |
- |
- |
试剂三(μL) |
80 |
- |
- |
- |
混匀, 50℃水浴1h 后,立即沸水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水/冰浴冷却。 |
- |
- |
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试剂三(μL) |
- |
80 |
- |
- |
10000rpm 25℃离心10min,取上清液 |
- |
- |
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上清液(μL) |
100 |
100 |
- |
- |
标准品(μL) |
- |
- |
100 |
- |
蒸馏水(μL) |
- |
- |
- |
100 |
试剂四(μL) |
200 |
200 |
200 |
200 |
充分混匀,室温静置 2min,10000g 常温离心 5min,取上清于微量玻璃比色皿/96 孔板中测定吸光值 A,分别记为A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管。计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。每个测定管设一个对照管。空白管和标准管只需做 1-2 次。
单位的定义:每天每g土样中产生1μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-β-XYS活力(U/g 土样)=ΔA测定÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T =0.444×ΔA÷ΔA标准÷W
T:反应时间,1h=1/24d;V反总:反应体系总体积:1.85×10-4L;C标准:标准溶液浓度,100μmol/L;W: 样本质量,g。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到