上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号：UPLC-MS-4003 规格：100T/96S 微量法
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试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
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试剂一 |
粉剂×2 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂二 |
液体 5 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂三 |
液体 50 mL×1 瓶（自备） |
2-8℃保存 |
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标准液 |
液体 10 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂一：临用前取 1 瓶加入 7 mL 蒸馏水，用不完的试剂 2-8℃保存 2 周；
2、 试剂三：自备乙醚；
3、 标准液：重铬酸钾溶液（5 mmol/L），相当于 0.2 mg/mL 紫色没食子素溶液。
S-PPO 主要来源于土壤微生物、植物根系分泌物及动植物残体分解释放，催化土壤中芳香族化合物氧化成醌， 醌与土壤中蛋白质、氨基酸、糖类、矿物等物质反应生成有机质和色素，完成土壤芳香族化合物循环，用于土壤环境修复。
S-PPO 能够催化邻苯三酚产生紫色没食子素，后者在 430nm 有特征光吸收。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板（非聚苯乙烯材质）、乙醚（不允许快递）、30~50 目筛、0.5mol/L HCL 溶液、冰和蒸馏水。
1、可见分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 430nm，可见分光光度计试剂三调零。
2、标准液稀释：用 0.5mol/L HCL 溶液将标准液稀释至 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0 mg/mL。
3、标准液稀释表：
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序号 |
稀释前浓度（mg/mL） |
标准液体积（µL） |
0.5mol/L HCl 体积（µL ） |
稀释后浓度（mg/mL） |
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1 |
0.2 |
1000 |
0 |
0.2 |
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2 |
0.2 |
500 |
500 |
0.1 |
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3 |
0.1 |
500 |
500 |
0.05 |
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4 |
0.05 |
500 |
500 |
0.025 |
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5 |
0.025 |
500 |
500 |
0.0125 |
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6 |
0.0125 |
500 |
500 |
0.00625 |
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7 |
0.00625 |
500 |
500 |
0.003125 |
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8 |
0.003125 |
0 |
500 |
0 |
备注：实验中每个标准管需 200µL 标准溶液。
4、标准曲线的建立：以 0 mg/mL 的标准液调零，取 200µL 稀释好的标准液于微量玻璃比色皿/96 孔板中在 430nm处测定吸光值A，根据吸光度（x）和浓度（y，mg/mL）做出标准曲线。
5、样本测定表（1.5mLEP 管）
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试剂名称 |
测定管 |
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风干土样（g） |
0.02 |
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试剂一（μL） |
120 |
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振荡混匀，30℃水浴反应 1h |
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试剂二（μL） |
50 |
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试剂三（μL） |
430 |
振荡数次，室温静置 30min，取 200μL 上层液于微量玻璃比色皿/96 孔板中，430nm 处测定吸光值A。三、S-PPO 活性计算
根据标准曲线，将样本吸光值A 带入公式中（x），计算出样本浓度 y（mg/mL）。单位的定义：每天每g 土样中产生 1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。
S-PPO（U/g 土样）=y×V 提取相÷W÷T =516×y
T：反应时间，1h=1/24d；V 提取相：提取相总体积，0.43mL；W：样本质量，0.02g。
乙醚易挥发，转移至酶标板时建议一次性不要测定太多样本。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到
