上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号：UPLC-MS-4057 规格：100T/48S 微量法
货号：UPLC-MS-4056 规格：50T/24S 可见分光光度法
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试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
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试剂一 |
液体 2mL×1 瓶（自备） |
2-8℃保存 |
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试剂二 |
液体 12mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂三 |
粉剂×2 瓶 |
-20℃保存 |
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试剂四 |
液体 30mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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标准品 |
液体 1mL×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂一：甲苯自备；
2、 试剂三：临用前取 1 瓶加入 5mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂-20℃分装保存一周，避免反复冻融；
3、 标准品：5mmol/L 的对硝基苯酚溶液。临用前用试剂二将标准品稀释 50 倍得 100μmol/L 的标准溶液。（具体稀释过程见操作步骤）
土壤芳基硫酸酯酶来自于土壤微生物，能酶促土壤有机硫化物转化为植物可吸收的无机态硫，在硫素的生物 化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用，是反映土壤质量的一个重要生物学指标。
S-ASF能够催化对-硝基苯硫酸钾生成对-硝基苯酚，后者在410nm有特征光吸收。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、 研钵、冰、30-50目筛、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
1、 分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至410nm，分光光度计用蒸馏水调零。
2、 标准溶液的稀释：取20μL 5mmol/L的对硝基苯酚溶液，加入980μL试剂二，充分混匀，配制成100μmol/L标准液待测，现用现配。（实验中每管需要100μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
3、 加样表：
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试剂名称（μL） |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
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风干土样（g） |
0.02 |
0.02 |
- |
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试剂一 |
10 |
10 |
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充分振荡混匀，使土样全部潮湿，室温放置15min |
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试剂二 |
100 |
100 |
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试剂三 |
80 |
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充分混匀，置于37℃水浴锅或37℃恒温培养箱反应1h后，立即沸水浴5min（盖紧，缠封口膜，防止水分散失），流水/冰浴冷 却。 |
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试剂三 |
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80 |
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10000rpm，25℃离心10min，取上清液待测 |
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上清液 |
100 |
100 |
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标准品 |
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100 |
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蒸馏水 |
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100 |
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试剂四 |
200 |
200 |
200 |
200 |
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充分混匀，室温静置 2min 后，吸取 200μL 反应液于微量玻璃比色皿/96 孔板中，测定吸光值 A，分别记为 A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管。计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。每个测定管需设一个对照管。标准管和空白管只需检测 1-2 次。
单位的定义：每天每g土样中产生1μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-ASF活力（U/g 土样）=ΔA测定÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T =0.456×ΔA测定÷ΔA标准÷W
T：反应时间，1h=1/24d；V反总：反应体系总体积：1.9×10-4L；C标准：标准溶液浓度，100μmol/L；W：样 本质量，g。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到
