上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-4001 规格:100T/48S 微量法
货号:UPLC-MS-4000 规格:50T/24S 紫外分光光度法
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 0.3 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂二 |
粉剂×1 支 |
2-8℃保存 |
试剂三 |
液体 3 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:液体置于试剂瓶内 EP 管中,使用前需将 EP 管先离心。临用前取 0.05 mL 试剂一加入 9.95 mL蒸馏水稀释待用或者按比例配制。用不完的试剂 2-8℃保存一周;
2、 试剂二:临用前加入 1 mL 蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂 2-8℃保存 4 周。
S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2清除系统中具有重要作用。
H2O2 在 240nm 下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应 S-CAT 活性的高低。
需自备的仪器和用品:紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板(UV板)、研钵、
30~50目筛和蒸馏水、。
1、 分光光度计/酶标仪预热30min 以上,调节波长至240nm,分光光度计用蒸馏水调零。
2、 加样表(1.5ml EP 管):
试剂名称 |
测定管 |
无基质管 |
无土管 |
风干土样(g) |
0.03 |
0.03 |
|
试剂一(μL) |
260 |
|
260 |
蒸馏水(μL) |
|
260 |
|
25℃振荡培养 20min |
试剂二(μL) |
10 |
10 |
10 |
混匀 8000g,25℃离心 5min,取全部上清 |
|||
试剂三(μL) |
30 |
30 |
30 |
混匀,取200μL至微量石英比色皿或96孔板(UV板)中,240nm处记录各管吸光值A。(每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做1-2管)
A、用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位的定义:每天每g风干土样催化1mmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:S-CAT(U/g 土样)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V 反总÷(ε×d)×10 3]÷W÷T
=16.5×(A无土管-A测定管+A无基质管)
V反总:反应体系总体积,3×10 -4 L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,43.6 L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;T: 反应时间,20 min=1/72d;W:样本质量,0.03g。
单位的定义:每天每g风干土样催化1mmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:S-CAT(U/g 土样)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V 反总÷(ε×d)×10 3]÷W÷T
=27.5×(A无土管-A测定管+A 无基质管)
V反总:反应体系总体积,3×10 -4L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,43.6 L/mol/cm;d:96孔板光径,0.6cm; T:反应时间,20 min=1/72d;W:样本质量,0.03g。
如果吸取的上清仍有部分浑浊,可以在加入试剂三后统一再次进行离心。
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