上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号：UPLC-MS-4055 规格：100T/48S 微量法
|
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
|
试剂一 |
液体 30mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
|
试剂二 |
粉剂×2 瓶 |
2-8℃保存 |
|
试剂三 A |
液体 0.4mL×1 支 |
2-8℃保存 |
|
试剂三 B |
液体 1.6mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
|
试剂四 |
液体 2mL×1 瓶 |
常温保存 |
|
标准品 |
液体 1mL×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂二：临用前取 1 瓶加入 6mL 蒸馏水溶解，用不完的试剂 2-8℃保存一周；
2、 试剂三：临用前根据样本量按比例（A:B=1:4）配制，现配现用；若发现变色后则不能再使用；
3、 标准品：10µmol/mL 氮标准液。取 15μL 10µmol/mL 氮标准液，加入 945μL 蒸馏水，充分混匀，配制成0.156μmol/mL 的标准液待测。（实验中每管需要 80μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
S-GLS（EC3.5.1.2）存在于某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用靛酚蓝比色法测定氨增加的速率，即可计算其酶活性。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、30~50目筛、研钵、甲苯（不 允许快递）、冰和蒸馏水。
1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至630nm，分光光度计用蒸馏水调零。
2、 样本测定（在EP管中加入下列试剂）
|
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
|
风干土样（g） |
0.05 |
0.05 |
- |
- |
|
甲苯（μL） |
25 |
25 |
- |
- |
|
常温静置10min。 |
- |
- |
||
|
试剂一（μL） |
275 |
275 |
- |
- |
|
试剂二（μL） |
200 |
- |
- |
- |
|
蒸馏水 |
- |
200 |
- |
80 |
|
充分混匀，37℃水浴或恒温培养箱培养1h。10000g常温离心10 min，取上清液于96孔板或者1.5mL EP 管中。 |
- |
- |
||
|
上清液 |
80 |
80 |
- |
- |
|
0.156μmol/mL标准液 |
- |
- |
80 |
- |
|
试剂三 |
16 |
16 |
16 |
16 |
|
试剂四 |
12 |
12 |
12 |
12 |
|
蒸馏水 |
92 |
92 |
92 |
92 |
混匀，室温放置 30min，630nm 处读取吸光值 A，分别记为 A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管，计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管，ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。标准管与空白管只需测 1-2 次。
单位定义：37℃下每g土壤每天催化谷氨酰胺生成1μmol 氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS（U/g 土样）=ΔA测定÷（ΔA标准÷C标准）×V酶促÷W÷T=1.872×ΔA测定÷ΔA标准÷W
V酶促：酶促反应总体积，0.5mL；T：反应时间，1/24d；W：土壤质量，g；C标准：标准液浓度，0.156μmol/mL。
1、 当测定吸光值大于0.8时，建议将上清液用蒸馏水进一步稀释后测量。计算时乘以稀释倍数。
2、 离心后若上清液仍含有少量杂质，可将上清液再次10000g，常温离心10min去除。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到
