上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号：UPLC-MS-4013 规格：100T/48S 微量法
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试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
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试剂一 |
粉剂×2 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂二 |
液体 2 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂三 |
液体 5 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂四 |
液体 50 mL×1 瓶（自备） |
2-8℃保存 |
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标准品 |
液体 10 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂一：临用前加入 5.5 mL 蒸馏水，用不完的试剂 2-8℃保存一周；
2、 试剂四：自备乙醚；
3、 标准品：相当于每 1mL 乙醚相中含有 0.2mg/mL 紫色没食子素。
S-POD主要来源于土壤微生物，能够氧化土壤有机物质产生过氧化物，在腐殖质的形成过程中具有重要作用。S-POD催化有机物质氧化成醌，后者在430nm有特征光吸收。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、0.5mol/L HCl溶液、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、乙醚（不允许快递）、研钵、冰和蒸馏水。
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30-50 目筛。
1、 标准品处理：将标准品用0.5 mol/L HCl溶液稀释至0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0mg/mL，可参考下表。
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序号 |
稀释前浓度（mg/mL） |
标准液体积（µL） |
0.5 mol/L HCl 体积（µL ） |
稀释后浓度（mg/mL） |
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1 |
0.2 |
300 |
300 |
0.1 |
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2 |
0.1 |
400 |
100 |
0.08 |
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3 |
0.1 |
300 |
200 |
0.06 |
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4 |
0.1 |
200 |
300 |
0.04 |
|
5 |
0.1 |
100 |
400 |
0.02 |
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6 |
0.1 |
50 |
450 |
0.01 |
|
7 |
- |
- |
500 |
0 |
备注：试验中每个标准管需200µL 标准溶液
2、 标曲测定：分光光度计预热30min以上，调节波长至430nm，0mg/mL管调零，直接测定稀释后各标准管的吸光度，记为A标准。
3、样本测定：
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试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
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风干土样（g） |
0.02 |
0.02 |
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蒸馏水 |
- |
20 |
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试剂一（μL） |
100 |
100 |
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试剂二（μL） |
20 |
- |
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振荡混匀，置于30℃水浴锅准确反应1 h |
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试剂三（μL） |
50 |
50 |
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试剂四（μL） |
430 |
430 |
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振荡数次，室温静置30min，取0.2mL上层液于430nm 处测定吸光值A，记为A测定管、A对照管。计算ΔA测定=A测定管-A对照管。（若使用分光光度计则使用试剂四调零）。 注：每个测定管需设一个对照管。 |
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1、标准曲线的建立
根据标准管的浓度（y，mg/mL）和吸光度A标准（x，A标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测定
（x）带入公式计算测定中样本的浓度y值（mg/mL）。
2、S-POD活力计算
单位的定义：每天每g土样中产生1mg紫色没食子素定义为一个酶活力单位。
S-POD活力（U/g 土样）=y×V 提取相÷W÷T=516×y
T：反应时间，1h=1/24d；V提取相：提取相总体积，0.43mL；W：样本质量，0.02g。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到
