上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-4067 规格:100T/48S 微量法
货号:UPLC-MS-4066 规格:50T/24S 可见分光光度法
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 30 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂二 |
粉剂×2 瓶 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂二:临用前取 1 瓶加入 1.875 mL 丙酮溶解,用不完的试剂 2-8℃保存一周。
S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、离心机、水浴锅、研钵、甲苯(不允许快递)、丙 酮(不允许快递)、30-50目筛、蒸馏水。
取新鲜土样自然风干或 37℃烘干,过 30-50 目筛。
1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至405nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、 加样表:
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测定管 |
对照管 |
风干土样(g) |
0.03 |
0.03 |
甲苯(μL) |
15 |
15 |
震荡混匀,室温静置15min。 |
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试剂一(μL) |
255 |
255 |
试剂二(μL) |
30 |
- |
置于30℃水浴锅准确反应1h后,立刻煮沸5min(盖紧,缠封口膜,防止崩开水分散失)。流水冷却至室温。 |
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试剂二(μL) |
- |
30 |
14000g,常温离心10min,取200μL上清于405nm处测定吸光值,分别记为A测定管、A对照管,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。 |
A 按微量比色皿计算:
酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。
S-LAP 活性(U/g 土样)=ΔA÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.507×ΔA÷W
ε:对硝基苯胺摩尔消光系数:9.87×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,300μL=3×10-4L; W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。
酶活性定义:每克土壤每分钟氧化1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。
S-LAP 活性(U/g 土样)=ΔA÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.844×ΔA÷W
ε:对硝基苯胺摩尔消光系数:9.87×103L/mol/cm;d:96孔板光径,0.6cm;V反总:反应总体积,300μL=3×10-4L; W:土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。
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