土壤木质素过氧化物酶(S-Lip)活性检测试剂盒



上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化elisa土壤植物细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测Elisa代测HPLC 检测GC检测GC-MS 检测LC-MS检测ICP-MS检测 、土壤植物动物成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

货号:UPLC-MS-4017                                  规格:100T/48S                         微量法

货号:UPLC-MS-4016                                  规格:50T/24S                           紫外分光光度法


产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。


试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 25 mL×1

2-8℃保存

试剂二

粉剂×2

2-8℃保存

试剂三

液体 10 μL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1. 试剂二:临用前取1瓶加入2.5mL乙醇溶解,用不完的试剂可以2-8℃保存2周,实验前再将试剂二用乙醇稀释10倍备用,用多少配多少。(1瓶粉剂溶解后可做100T,为了延长使用时间,此产品多给1瓶粉剂)

2. 试剂三:使用前请离心再用。取 2μL 试剂三加入 1mL 蒸馏水充分混合备用(约 66T 的量),现用现配,也可根据样本量按比例配制。

产品说明:

木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。

木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在310nm处有特征吸收峰。


注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV板、水浴锅、震荡仪、研钵、甲苯(不    允许快递)、乙醇(不允许快递)、30-50目筛、蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献) 

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30~50 目筛。

二、测定步骤

1. 紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至310nm,紫外分光光度计蒸馏水调零。


2. 样本测定:

 

测定管

对照管

土样(g

0.03

0.03

甲苯(μL

15

15

 

室温静置15min

试剂一(μL

240

240

试剂二(μL

30

-

试剂三(μL

15

-

30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min

试剂二(μL

-

30

试剂三(μL

-

15

12000g常温离心10min。取200μL上清于微量石英比色皿中或96UV板中测定310nm处的吸光值,分

别记为A测定管、A对照管,计算ΔA=A测定管-A对照管。

三、酶活计算公式

A、按微量石英比色皿计算:

酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol 藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位。

S-LiP活性(U/g 土样)=ΔA÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.538×ΔA÷W

ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.3mL=3×10-4L;W   土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。

B、按96UV板计算:

酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol 藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位。

S-LiP活性(U/g 土样)=ΔA÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.896×ΔA÷W

ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d;96孔板光径,0.6cm;V反总:反应总体积,0.3mL=3×10-4L;W   土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。


上一篇:土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒
下一篇:土壤尿酸酶活性检测试剂盒

独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到

咨询热线
400-998-2324
欢迎关注官方微信
版权所有:上海液质检测技术有限公司    网站备案号:沪ICP备2022005945号
400-998-2324
0.049343s