上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-4017 规格:100T/48S 微量法
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 25 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂二 |
粉剂×2 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三 |
液体 10 μL×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1. 试剂二:临用前取1瓶加入2.5mL乙醇溶解,用不完的试剂可以2-8℃保存2周,实验前再将试剂二用乙醇稀释10倍备用,用多少配多少。(1瓶粉剂溶解后可做100T,为了延长使用时间,此产品多给1瓶粉剂)
2. 试剂三:使用前请离心再用。取 2μL 试剂三加入 1mL 蒸馏水充分混合备用(约 66T 的量),现用现配,也可根据样本量按比例配制。
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在310nm处有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品:
天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV板、水浴锅、震荡仪、研钵、甲苯(不 允许快递)、乙醇(不允许快递)、30-50目筛、蒸馏水。
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30~50 目筛。
1. 紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上,波长调至310nm,紫外分光光度计蒸馏水调零。
2. 样本测定:
|
测定管 |
对照管 |
土样(g) |
0.03 |
0.03 |
甲苯(μL) |
15 |
15 |
室温静置15min |
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试剂一(μL) |
240 |
240 |
试剂二(μL) |
30 |
- |
试剂三(μL) |
15 |
- |
30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。 |
||
试剂二(μL) |
- |
30 |
试剂三(μL) |
- |
15 |
12000g常温离心10min。取200μL上清于微量石英比色皿中或96孔UV板中测定310nm处的吸光值,分 别记为A测定管、A对照管,计算ΔA=A测定管-A对照管。 |
A、按微量石英比色皿计算:
酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol 藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP活性(U/g 土样)=ΔA÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.538×ΔA÷W
ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.3mL=3×10-4L;W: 土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。
酶活性定义:每克土壤每分钟生成1nmol 藜芦醛所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP活性(U/g 土样)=ΔA÷(ε×d) ×109×V反总÷W÷T=0.896×ΔA÷W
ε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d;96孔板光径,0.6cm;V反总:反应总体积,0.3mL=3×10-4L;W: 土样质量,g;T:反应时间,60min;109:单位换算系数,1mol=109nmol。
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