上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号：UPLC-MS-4071 规格：100T/48S 微量法
货号: UPLC-MS-4070 规格: 50T/24S 可见分光光度法
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试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
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试剂一 |
液体 100 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂二 |
液体 5.5 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂三 |
粉剂×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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标准品 |
液体 1 mL×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂三：临用前配制，加入 8 mL 蒸馏水，充分溶解后加入 4 mL 试剂二，混匀；配好的溶液应为浅黄色。若变色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，该试剂应现配现用。
2、 标准品：40 µg/mL 无机磷标准品。
土壤总磷包括有机磷和无机磷，其中无机磷能够直接被植物利用。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷。 同时测定土壤总磷、有机磷和无机磷，可以全面反映土壤磷营养状况。
利用钼蓝法定磷。取一份土样，通过浸提法测定土壤无机磷含量；另外取一份土样，经高温灼烧后，土壤有 机磷转化为无机磷，测得土壤总磷含量；总磷含量减去无机磷含量，即可计算出有机磷含量。
最低检出限：0.3932 µg/mL
线性范围：1-400 µg/mL
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、可调式水浴锅、分析天平、可调式移液器、
550℃高温电炉、研钵、蒸馏水、30-50目筛、100目筛。
一、样本处理：（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1. 无机磷：称取通过 30-50 目筛子的风干土样 0.01g，转移到 1mL 离心管，加入 1mL 试剂一，震荡混匀，然后置于 45℃水浴 1h，8000rpm，离心 10min，取上清液一，用于无机磷含量测定。
2. 总磷提取：取通过 100 目筛子的风干土样，550℃灼烧 1h，冷却后称取约 0.01g，转移到 1 mL 离心管，加入 1mL 试剂一，震荡混匀，然后置于 45℃水浴 1h，8000rpm，离心 10min，取上清液二，用于总磷含量测定。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。
2、 打开水浴锅，调节温度到40℃。
3、 空白管：取EP管，依次加入100μL蒸馏水，100μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10min后于660nm测定吸光度，记为A空白管。空白管只需做1-2次。
4、 标准管：取EP管，依次加入10μL标准液，90μL蒸馏水，100μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10min后于660nm测定吸光度，记为A标准管。标准管只需做1-2次。
5、 测定管：取EP管，依次加入10μL上清液一或者上清液二，90μL蒸馏水，100μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10min后于660nm测定吸光度，记为A测定管。
1. 土壤无机磷含量（μg/g 土样）=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W
=40×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W C标准液：40 μg/mL； W：土壤样本质量，g；V总：上清液一总体积，1mL。
2. 土壤总磷含量（μg/g 土样）=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W
=40×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W C标准液：40 μg/mL；W：土壤样本质量，g；V总：上清液二总体积，1mL。
3. 土壤有机磷（μg/g 土样）=土壤总磷-土壤无机磷
1、 试剂三配制过程中，可能会产生黑色固体，其不影响结果，注意吸取时不要将黑色固体吸入。
2、 如果吸光值大于1时，样本需用蒸馏水做相应稀释。
3、 空白管和标准管只需测定1-2次。
4、 需在40min内完成比色。
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