上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号：UPLC-MS-4075 规格：100T/96S 微量法
货号：UPLC-MS-4074 规格：50T/48S 可见分光光度法
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试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
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提取液 |
液体 80 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂一 |
粉剂×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂二 |
粉剂×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂三 |
液体 15 mL×1 瓶 |
常温保存 |
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标准品 |
液体 1 mL×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂一：临用前加入 15 mL 蒸馏水，溶解后 2-8℃保存一周；
2、 试剂二：临用前加入 15 mL 蒸馏水，溶解后 2-8℃保存一周；
3、 标准品：10 μmol/mL 标准磷储备液；
4、 工作液（定磷剂）的配制：按 H2O：试剂一：试剂二：试剂三=2:1:1:1 的比例配制，配好的工作液应为浅黄色。若变色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，工作液应现配现用。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷、一部分微溶性的无机磷和易矿化的有机磷等，土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。
用弱碱法提取碱溶性磷和吸附态磷，钼蓝与磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物质，通过测定 660nm 光吸收， 即可计算磷含量。
最低检出限：0.0042 μmol/mL
线性范围：0.015625-2 μmol/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
实验中所需仪器和用品：
可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、30-50目筛、漩涡震荡仪、研钵、EP 管、蒸馏水。
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样风干，过 30-50 目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为 1：10-20 的比例（建议称取约 0.05g
土样，加入 1mL 提取液），振荡提取 1h，10000g，25℃离心 10min，取上清液待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至660nm，蒸馏水调零。
2、 将10μmol/mL标准液用提取液稀释为2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625μmol/mL的标准溶液备用。
3、 标准溶液稀释表：
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序号 |
稀释前浓度（μmol/mL） |
标准液体积（µL） |
提取液体积（µL） |
稀释后浓度（μmol/mL） |
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1 |
10 |
100 |
400 |
2 |
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2 |
2 |
250 |
250 |
1 |
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3 |
1 |
250 |
250 |
0.5 |
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4 |
0.5 |
250 |
250 |
0.25 |
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5 |
0.25 |
250 |
250 |
0.125 |
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6 |
0.125 |
250 |
250 |
0.0625 |
4、 操作表：(在1.5mL离心管中
5、 样本测定：(在1.5mL离心管中或96孔板依次加入下列试剂)
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测定管 |
标准管 |
空白管 |
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样本（µL） |
100 |
- |
- |
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标准溶液（µL） |
- |
100 |
- |
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提取液（µL） |
200 |
200 |
300 |
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工作液（µL） |
400 |
400 |
400 |
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H2O（µL） |
300 |
300 |
300 |
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充分混匀，25℃静置30min。于1mL玻璃比色皿，测定660nm处吸光值A，分别记为A测定管、A标准管和A空
白管，ΔA=A测定管-A空白管，ΔA标准=A标准管-A空白管。(空
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