西红花苷 检测



一、服务概述

西红花苷(Crocin,又称藏红花素)是名贵中药西红花/番红花(鸢尾科植物番红花 Crocus sativus 的干燥柱头)和栀子(茜草科植物栀子 Gardenia jasminoides 的果实)中的主要水溶性色素及活性成分,属类胡萝卜素类糖苷——即西红花酸(crocetin)的糖酯。

其中西红花苷 ICrocin Iα-藏红花素)含量最高、最具代表性,由西红花酸与两分子龙胆二糖(gentiobiose)成酯(C44H64O24);此外还有西红花苷 IICrocin II)等。西红花苷 III 是《中国药典》西红花含量测定的指标成分。

现代药理研究表明,西红花苷具有抗氧化、神经保护、抗抑郁、抗肿瘤、保肝、改善学习记忆等作用,是西红花和栀子黄色的核心功效与显色成分。

我们提供西红花苷 III 及西红花酸的定性确证与精确定量检测服务,覆盖西红花/番红花、栀子、含栀子/西红花的中成药、保健品、食品及生物样品等多种基质。

二、化合物信息

成分

英文名

CAS

分子式

分子量

西红花苷 I

Crocin Iα-Crocin

42553-65-1

C44H64O24

977.0

西红花苷 II

Crocin II

55750-84-0

C38H54O19

814.8

西红花酸(苷元)

Crocetin

27876-94-4

C20H24O4

328.4

 

结构说明:西红花苷为西红花酸(类胡萝卜素型二羧酸)的糖酯,西红花苷 I 为二龙胆二糖酯,西红花苷 II 为龙胆二糖-葡萄糖酯。

三、检测方法

3.1 HPLC-UV/Vis —— 440 nm 可见光检测(药典质控法)

西红花苷具有高度共轭的多烯结构,在 440 nm 附近有强可见光吸收(呈黄色/红色),HPLC 结合可见光检测(440 nm)是测定西红花苷 III 的标准方法,灵敏度高、基质干扰小,明显优于末端吸收检测。

· 色谱柱:反相 C18 柱(4.6 mm × 250 mm5 μm);

· 流动相:甲醇-水 或 乙腈-水体系(可加少量酸),梯度或等度洗脱;

· 检测波长:440 nm(西红花苷 III 特征可见吸收);

· 流速:1.0 mL/min;柱温:2535 ℃

· 适用:西红花/栀子药材、饮片、提取物含量测定与质控。

3.2 LC-MS/MS —— 精确定量与痕量分析

西红花苷为多羟基糖酯,ESI⁻ 负离子模式响应良好,适合单体精确定量与复杂基质痕量分析。

· 西红花苷 I:母离子 [M−H]⁻ = 976.0,碎片脱龙胆二糖(−324→ 652 → 再脱龙胆二糖(−324→ 327(西红花酸苷元);正离子可选 [M+Na]⁺ = 999.9

· 西红花苷 II:母离子 [M−H]⁻ = 813.8

· 参考 MRM976.0 → 652.3 → 327.2(西红花苷 I);813.8 → 489.3(西红花苷 II);

· 适用:痕量定量、生物样品(血浆/组织)、复方制剂、药代动力学研究。

3.3 方法对比

参数

HPLC-UV/Vis

LC-MS/MSESI⁻ MRM

测定对象

西红花苷 I/II 单体

西红花苷 I/II(痕量)

检测限

μg/mL

ng/mL

特异性

较高(440 nm 可见区干扰小)

高(MRM 选择性)

最佳用途

药材质控、含量测定

痕量分析、生物样品、药代

 

四、样品前处理

基质类型

典型样品

前处理流程

关键注意

药材

西红花/番红花柱头、栀子果实

粉碎 甲醇或乙醇超声/回流提取 离心 → 0.45 μm 滤膜 进样

西红花苷对光、热敏感,应避光、低温操作

提取物/制剂

栀子黄色素、含栀子/西红花中成药

甲醇/乙醇溶解 离心过滤 SPE 净化 进样

注意复方中其他色素/成分干扰

生物样品

血浆、血清、组织

乙腈沉淀蛋白 离心 蒸干复溶 → SPEC18/HLB→ LC-MS/MS

生物利用度低,痕量需 LC-MS/MS

 

五、服务内容

套餐 A:HPLC 440 nm 西红花苷 I/II 含量测定(药典质控版)

· 目标物:西红花苷 I、西红花苷 II;方法:HPLC-UV/Vis440 nm);

· 报告:各成分含量 + 合规性判定 + 色谱图;周期:510 个工作日。

套餐 B:LC-MS/MS 精确定量(科研/痕量版)

· 目标物:西红花苷 I/II(可加西红花酸);方法:LC-MS/MS ESI⁻ MRM

· 报告:含量 + MRM 色谱图 + 离子比确证;周期:1015 个工作日。

套餐 C:定制化检测

· 西红花苷 I/II + 西红花酸全谱、栀子苷(京尼平苷)等多组分、复方制剂方法学开发、药代动力学、方法学验证等,按需定制。

六、样品要求与服务流程

· 样品量:固体 ≥ 5 g,液体 ≥ 10 mL,生物样品请提前沟通;

· 服务流程:需求沟通 方案报价 寄样登记 检测 报告交付 售后支持;

· 质控保障:标准品校准曲线 + 平行样 + 回收率/RSD 质控,可提供原始数据。

七、常见问题 FAQ

Q1:西红花苷 I 和西红花苷 II 有什么区别?

A:两者都是西红花酸(crocetin)的糖酯,区别在于糖链:西红花苷 I 含两分子龙胆二糖(4 个葡萄糖),西红花苷 II 含一分子龙胆二糖加一分子葡萄糖(3 个葡萄糖)。西红花苷 I 含量最高,是主要指标成分,药典常以 I II 总量作为质控依据。

Q2:西红花和栀子都含西红花苷,检测一样吗?

A:西红花苷检测方法通用,但两者的含量与成分谱不同——西红花以柱头入药、西红花苷 I 极高,栀子以果实入药、同时富含栀子苷(京尼平苷)。检测时应根据样品来源选择对应指标与判定标准。

Q3:为什么西红花苷用 440 nm 检测而不是 205 nm 末端吸收?

A:西红花苷具有高度共轭的多烯结构,在可见光区(约 440 nm)有强特征吸收,检测灵敏度高、专属性好、基质干扰小,远优于普通三萜/环烯醚萜苷的末端吸收检测,因此是其标准检测波长。



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