直链淀粉含量检测试剂盒-直链淀粉检测试剂盒-上海液质



上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化elisa土壤植物细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测Elisa代测HPLC 检测GC检测GC-MS 检测LC-MS检测ICP-MS检测 、土壤植物动物成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购


货号:UPLC-MS-4135 规格:100T/96S 微量法
货号:UPLC-MS-4134 规格:50T/48S 可见分光光度法

产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。


试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 60 mL×1

2-8℃保存

试剂二

液体 50 mL×1 瓶(自备)

2-8℃保存

试剂三

液体 30 mL×1

2-8℃保存

试剂四

-

2-8℃保存

试剂五

液体 1.5 mL×1

2-8℃保存

试剂六

液体 10mL×1

2-8℃保存

标准品

粉剂×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1 试剂二:乙醚 50 mL 自备;

2 试剂四:提供 125mL 空瓶一个;将试剂三:H2O =9 mL91 mL 混匀,现用现配,2-8℃保存半年;

3 标准品:10 mg 直链淀粉。临用前加入 0.1 mL 无水乙醇和 0.9 mL 试剂三,混匀后封口膜封口,沸水浴至溶解,即 10 mg/mL 的直链淀粉,2-8℃保存半年。

产品说明:

直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键链接的多糖链,直链淀粉含量影响着食品的食用品质和外观品质,与食品安全息息相关。直链淀粉和碘形成蓝色络合物,利用乙醇分开样本中的可溶性糖和淀粉,再用碘与其反应得到直链淀粉含量。

技术指标: 

最低检出限:0.006 mg/mL

线性范围:0.0125-0.6 mg/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。


需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP 管、蒸馏水。


操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

1 称取 0.01g 烘干样本,加入 1mL 试剂一,充分匀浆;

2 80℃水浴提取 30min,3000g,25℃离心 5min,弃上清,留沉淀;

3 在步骤 2 沉淀中加入 1mL 试剂二(乙醚)振荡 5min;3000g,25℃离心 5min,弃上清,留沉淀;

4 在步骤 3 沉淀中加入 5mL 试剂四充分溶解,90℃水浴 10min,冷却后 3000g,25℃离心 5min,取上清待测。

二、测定步骤

1 分光光度计预热 30min 以上,调节双波长至 550nm 485nm,蒸馏水调零。

2 标准溶液的稀释:取 40μL 10mg/mL 标准溶液,加入 960μL 试剂四,充分混匀,配制成 0.4mg/mL 标准溶液使用,现用现配。(实验中每管需要 100μL,为减小实验误差,故配制大体积。)

3 操作表 ( 1.5mL 离心管中依次加入下列试剂) :

试剂名称

测定管

标准管

空白管

样本(µL

100

-

-

标准溶液(μL

-

100

-

蒸馏水(µL

-

-

100

试剂五(µL

20

20

20

试剂六(µL

20

20

20

蒸馏水(µL

860

860

860

充分混匀,测定 550nm  485nm 处的吸光值,550nm 下的测定管、标准管、空白管分别记为 A 定、A 标准和A 空白,485nm 下的分别记为 A’测定、A’标准、A’空白,计算 ΔA 测定=A 测定-A 空白

-A测定-A空白ΔA 标准=A 标准-A 空白-A标准-A空白。标准管和空白管只需测 1-2 次。

三、直链淀粉含量计算

直链淀粉含量(mg/g 质量)=ΔA 测定÷(ΔA 标准÷C 标准)×V 样总÷W=2×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W C 标准:标准溶液浓度,0.4mg/mL;V 样总:加入试剂四体积,5mL;W:样本质量,g。

注意事项:

1 反应后建议在 20min 内检测完成防止褪色。

2 A 测定大于 1,建议样本上清用试剂四稀释后再进行测定;若 A 测定低于 0.03 时,可以提取时减少试剂四体积进行测定。注意同步修改计算公式。



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