乙醇含量检测试剂盒-乙醇检测试剂盒-上海液质



上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化elisa土壤植物细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测Elisa代测HPLC 检测GC检测GC-MS 检测LC-MS检测ICP-MS检测 、土壤植物动物成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购


货号:UPLC-MS-5078 规格:100T/96S 微量法
货号:UPLC-MS-5077 规格:50T/48S 可见分光光度法

产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 157 μL×1

-20℃保存

试剂二

液体 30 mL×1

4℃保存

试剂三 A

液体 15 mL×1

4℃保存

试剂三 B

液体 15 mL×1

4℃保存

标准品

液体 0.5 mL×1

4℃保存

溶液的配制:

1 试剂一:临用前根据实验所需用量,按照试剂一:蒸馏水=2.5μL:47.5μL(1T 的量)的比例,充分混匀, 现用现配。

2 试剂三:临用前根据实验所需用量,按照试剂三 A 液:试剂三 B 液=1:1 的比例,充分混匀,现用现配。

3 标准品:临用前取 10μL   390μL  蒸馏水混合配制成 0.428 mol/L 的标准溶液备用,现用现配。

产品说明:

酒是含酒精(乙醇)饮料的统称,乙醇是酒的主要成分,是衡量酒质量的重要指标之一。乙醇可用于制造醋酸、饮料、香精、染料、燃料等,医疗上常用体积分数为 70%~75%的乙醇作消毒剂。乙醇在化学工业、医疗卫生、食品工业、农业生产等领域都有广泛的用途。乙醇在乙醇氧化酶的催化下氧化产生过氧化氢。过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在 505nm 有特征吸收峰。测定 505nm 吸收峰的变化可以反应乙醇含量

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、研钵/匀浆器、1 mL 玻璃比色皿、冰和蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

1、组织:按照组织质量(g)︰蒸馏水体积(mL) 1︰5~10 的比例(建议称取约 0.1 g 组织,加入 1 mL 蒸馏水)进行冰浴匀浆,然后 8000 g,4℃,离心 10 min,取上清置于冰上待测。

2、液体:直接检测。若液体浑浊可离心后取上清检测。

二、测定步骤

1 分光光度计预热 30 min 以上,调节波长至 505 nm,蒸馏水调零。

2 操作表:

试剂名称(µL

测定管

标准管

空白管

试剂一

50

50

50

试剂二

450

450

450

试剂三

450

450

450

样品

50

 

 

标准品

 

50

 

蒸馏水

 

 

50

充分混合后,立即测定 505nm 下的吸光值 A1,然后 37℃(哺乳动物) 25℃(其他物种)水浴中反应60min,再测定反应60min 的吸光值 A2ΔA 测定=A2 测定管-A1 测定管,ΔA 标准=A2 标准管-A1 标准管, ΔA 空白=A2空白-A1 空白管,(空白管、标准管只需做 1-2 管)。

若样本数量过多,可将试剂一、试剂二、试剂三按比例配制成工作液使用。

三、乙醇含量计算

1. 按样本质量计算

乙醇含量(mmol /g 质量)=(ΔA 测定-ΔA 空白)×C 标准÷(ΔA 标准-ΔA 空白)×V 样÷(V 样÷V 样总×W)×F=(ΔA 测定-ΔA 空白)×0.428÷(ΔA 标准-ΔA 空白)÷W×F

2. 按液体体积计算

乙醇含量(mmol /mL)=(ΔA 测定-ΔA 空白)×0.428÷(ΔA 标准-ΔA 空白)×F

C 标准:标准管浓度,0.428 mol/L=0.428 mmol/mL ;V 样总:上清液总体积,1mL;V 样:加入反应体系中上清液体积,10μL=0.01mL;W:样本质量,g F:稀释倍数。

注意事项:

1、如果测定吸光值 A>1.5 ΔA>0.5,建议稀释样本后再测定,计算公式中乘以稀释倍数;如果测定吸光值较低或接近空白 OD 值,建议增加样本的加入量或者延长反应时间(2 小时或者更长时间)后再进行测定。

2、若样本数量过多,可将试剂一、试剂二、试剂三按比例配制成工作液使用。

3、建议一次测定不要测定过多样本以免耽误过多的酶促反应时间。


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