血氨含量检测试剂盒-血氨检测试剂盒-上海液质



上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化elisa土壤植物细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测Elisa代测HPLC 检测GC检测GC-MS 检测LC-MS检测ICP-MS检测 、土壤植物动物成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

货号:UPLC-MS-4640 规格:100T/96S 微量法
货号:UPLC-MS-4639  规格:50T/48S 可见分光光度法

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

提取液一

液体 20 mL×1

4℃保存

提取液二

液体 20 mL×1

4℃保存

试剂一 A

液体 4 mL×1

4℃保存

试剂一 B

液体 16 mL×1

4℃保存

试剂二

液体 15 mL×1

4℃保存

标准品

液体 1 mL×1

4℃保存

溶液的配制:

1、试剂一:临用前将 A 液与 B 液按照体积比 1:4 混匀,根据试验所需量现配现用;

2、标准品:100μmol/mL 氮标准液。

产品说明:

血氨主要来源是内源性氨和外源性氨。氨在血中保持恒定状态,即血氨的来源和去路保持动态平衡。氨是有毒物质,主要在肝脏进行代谢解毒。当肝功能严重损害时,氨不能被解毒。氨在中枢神经系统聚集,从而导致肝性脑病。

本法根据氨的靛酚蓝反应原理,通过蛋白沉淀剂将血清(浆)中蛋白沉淀后,利用酚-次氯酸盐直接显色法测定血氨,生成的蓝色靛酚和氨的浓度成正比,在630 nm处有特殊吸收峰,据此可由吸光值计算出样本中血氨的含量。

技术指标:

最低检出限:0.0251 μmol/mL

线性范围:0.0625-8 μmol/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、蒸馏水、EP 管。

适用范围:

本试剂盒可测各种动物血清(浆)等样本中血氨的含量。

操作步骤:

一、测定步骤

1 分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长至 630 nm,蒸馏水调零。

2 标准品的准备:将 100 µmol/mL 的氮标准液用蒸馏水稀释至 6、4、2、1、0.5、0.25、0.125 µmol/mL 的标准溶液备用。

3 操作表:(在 1.5 mL EP 管中操作)

试剂名称(µL

空白管

测定管

标准管

血清(浆)

 

50

 

标准品稀释液

 

 

50

蒸馏水

50

 

 

提取液一

125

125

125

提取液二

125

125

125

充分混匀,3500 rpm 离心 10 min,取上清待测

上清液

100

100

100

试剂一

100

100

100

试剂二

100

100

100

充分混匀,37℃水浴 20 min

200 µL 反应液,于微量玻璃比色皿/96 孔板中测定 630 nm 处吸光值 A,分别记为 A 白管、A 测定管、A 标准管。计算 ΔA= A 测定管-A 空白管,ΔA 标准= A 标准管-A 空白管。

二、血氨含量计算

1 标准曲线的绘制:

以各个标准溶液的浓度为 x 轴,其对应的 ΔA 标准为 y 轴,绘制标准曲线,得到标准方程 y= kx+b,将 ΔA 带入方程得到 x(µmol/mL)。

2 血氨含量的计算:

血氨含量(μmol/mL)= x×V 样÷V 样= x V 样:加入的样本体积,0.05mL。

注意事项:

1. 同一批检测样本需配 1-2 个空白管。

2. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

3. 试剂一配置后尽快使用,若发现变色则不能使用。

4. 所用器材和取血装置均应无氨;采血后应立即测定,不能立即测定 2-8℃可保留 2h;样本禁止溶血。


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