上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-4099 | 规格:100T/96S | 微量法 |
货号:UPLC-MS-4098 | 规格:50T/48S |
可见分光光度法 |
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
粉剂×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂二 |
液体 5 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂三 |
液体 10 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂四 |
粉剂×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂五 |
粉剂×1 瓶 |
4℃保存 |
试剂六 |
液体 20 mL×1 瓶 |
4℃保存 |
标准品 |
液体 1 mL×1 支 |
常温保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:临用前加入 2 mL 蒸馏水溶解;
2、 试剂四:临用前加入 5 mL 蒸馏水充分溶解待用;
3、 试剂五:加三氯甲烷(自备)50 mL 充分溶解;
4、 标准品:4000 nmol/mL Hg2+,临用前用水稀释 400 倍即 10nmol/mL 标准溶液。
Hg2+是水体中重要有毒重金属离子,易被生物体吸收并且积累,能够通过食物链进一步传递,从而造成伤害。典型的水俣病就是汞中毒的一种。
水样经消化后,在酸性环境中,Hg2+能与双硫腙生成橙色络合物,溶于三氯甲烷,在490nm测定吸光度,即可计算Hg2+含量。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板(非聚丙烯/聚苯乙烯材质)、可调式移液枪、浓硫酸、浓硝酸、三氯甲烷(氯仿)、蒸馏水。
每采集 1000mL 水样后立即加入 7mL 硝酸,调节每个样本的 pH,使之低于或等于 1。若取样后不能立即测量, 向每升样本中加入试剂二 4mL 或更多,使之呈现持久的淡红色。
1、 可见分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 490nm,氯仿调零。
2、 操作表(在 1.5mLEP 管中分别加入):
试剂名称(μL) |
测定管 |
标准管 |
空白管 |
水样 |
400 |
- |
|
标准溶液 |
- |
400 |
|
蒸馏水 |
- |
- |
400 |
浓硫酸 |
16 |
16 |
16 |
浓硝酸 |
4 |
4 |
4 |
试剂一 |
13 |
13 |
13 |
试剂二 |
24 |
24 |
24 |
封口膜封口,充分混匀,震荡 2min。95℃水浴中消化 2 小时,冷却至大约 40℃。 |
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试剂三 |
80 |
80 |
80 |
震荡至 EP 管内溶液澄清透明,开盖放置 10min,期间摇荡数次,使其中气体溢出。 |
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试剂四 |
32 |
32 |
32 |
试剂五 |
400 |
400 |
400 |
盖紧后充分震荡 2min,静置 10min,吸取下层有机相 300μL 至 1.5mL EP 管中。 |
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试剂六 |
160 |
160 |
160 |
充分震荡使有机相无绿色,静置分层后吸取 200μL 有机相于微量玻璃比色皿中/96 孔板中,测定其在490nm 波长下的吸光度,分别记为 A 测定,A 标准,A 空白,计算 ΔA 测定=A 测定-A 空白,ΔA 标准=A 标准-A 空白。 |
Hg2+(nmol/mL)= C 标准品×ΔA 测定÷ΔA 标准=10×ΔA 测定÷ΔA 标准
C 标准品:标准品浓度,10nmol/mL。
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