上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

溶液的配制：

1、 试剂三：临用前取 1 瓶加入 18mL 试剂一充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 4 周，避免反复冻融；

2、 试剂四：临用前取 1 支加入 1.2 mL 试剂二充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周，避免反复冻融；

3、 标准品液：10 μmol/mL 谷氨酸标准品。

产品说明：

Glu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一，而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。此外，Glu还是味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。谷氨酸脱氢酶（GDH）催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH +，在1-mPMS作用下，WST-1可与NADH反应，产生水溶性formazan，计算谷氨酸含量。

技术指标：

最低检出限：0.009 μmol/mL

线性范围： 0.019-0.3125 μmol/mL

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、超声破碎仪、冰、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

细菌、细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率 200w，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），10000g，常温离心 10min，取上清待测。

组织：称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一，进行冰浴匀浆，10000g，常温离心 10min，取上清待测。液体：直接测定。（若有浑浊则离心后取上清测定）

二、测定步骤

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至450nm，蒸馏水调零。

2. 标准溶液的制备：将标准品用蒸馏水分别稀释为0.3125，0.15625，0.078125，0.039，0.0195、0.01μmol/mL的标准溶液。

3. 标准品稀释表：

实验中每个标准管需200µL标准溶液。

三、谷氨酸含量计算

1. 标准曲线的绘制：根据标准管的浓度（x，µmol/mL）和吸光度ΔA标准（y，ΔA标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA代入方程得到x（µmol/mL）。

2. 谷氨酸含量计算：

（1） 按照蛋白浓度计算：

谷氨酸含量（µmol/mg prot）=x×V样本÷（Cpr×V样本）=x÷Cpr

（2） 按照样本质量计算：

谷氨酸含量（µmol/g 质量）=x×V样本÷（W÷V样总×V样本）=x÷W

（3） 按照细菌或细胞数量计算：