甘油三酯( TG) 含量检测试剂盒-甘油三酯( TG) 检测试剂盒-上海液质



上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化elisa土壤植物细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测Elisa代测HPLC 检测GC检测GC-MS 检测LC-MS检测ICP-MS检测 、土壤植物动物成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购


货号:UPLC-MS-4399 规格:100T/96S 微量法
货号:UPLC-MS-4398 规格:50T/48S 可见分光光度法

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 160 mL×1 瓶(自备)

4℃保存

试剂二

液体 10 mL×1

4℃保存

试剂三

液体 20 mL×1

4℃保存

试剂四

液体 5 mL×1

4℃保存

试剂五

液体 15 mL×1

4℃保存

试剂六

液体 15 mL×1

4℃保存

标准品

粉剂×1

4℃保存

溶液的配制:

1 试剂一:自备玻璃空瓶,正庚烷和异丙醇按体积比 1:1 混合,盖紧后混匀;

2 标准品:临用前加 5 mL 试剂一,即 1 mg/mL 甘油三酯标准溶液,4℃保存。

产品说明:

TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。测定原理:用异丙醇抽提取 TG,KOH 皂化 TG 后水解生成甘油及脂肪酸,过碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质,在 420nm 有特征吸收峰,其颜色的深浅与 TG 含量成正比。

技术指标:

最低检出限:0.0372 mg/mL

线性范围:0.0625-3 mg/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、研钵/匀浆器、微量玻璃比色皿/96 孔板、水浴锅、可调式移液枪、正庚烷、异丙醇、蒸馏水、玻璃空瓶。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

1 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清待测。

2 细胞、细菌:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,离心弃上清,加 1mL 试剂一,超声波破碎 1min强度 20%,超声 2s,停 1s),8000g,4℃离心 10min,取上清待测。

3 血清(浆)等液体样本:直接测定。

二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长到 420 nm,蒸馏水调零。

2. 水浴锅预热到 65℃。加试剂一后充分混匀,再加试剂二,剧烈振荡 30s,静置 3-5min 后再剧烈震荡 30s,如此反复 3 次,常温静置一定时间分层后取上层溶液 30μL,置于新的 EP 管中。

3. 甘油三酯含量测定:

 

空白管

标准管

测定管

上层溶液(μL

30

30

30

试剂三(μL

100

100

100

试剂四(μL

30

30

30

充分混匀,65℃水浴 3min,冷却

试剂五(μL

100

100

100

试剂六(μL

100

100

100

充分混匀,65℃水浴 15min,冷却

冷却后吸取 200μL 至微量玻璃比色皿/96 孔板测定 420nm  处吸光度,记为 A 空,A 标和 A 测。(空白管和标准管需检测 1-2 次。)

三、TG 计算公式

           1. 血清(浆)中甘油三酯含量:

TG 含量(mg/dL)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)×100=100×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)

C 标准品:1mg/mL;100:单位换算系数,1dL=100mL。

2. 组织中甘油三酯含量:

 (1) 按样本蛋白浓度计算

TG 含量(mg/ mg prot)=C 标准品×V×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷(Cpr×V)=(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷ Cpr

   (2) 按样本质量计算

TG 含量(mg/ g 质量)=C 标准品×V×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷W=(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷ W C 标准品:1mg/mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V:加入试剂一的体积,1mL。

3. 细胞、细菌中甘油三酯含量:

TG 含量(mg/104 cell)=C 标准品×(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷细菌或细胞密度=(A 测-A 空)÷(A 标-A 空)÷细菌或细胞密度C 标准品:1mg/mL;细菌或细胞密度:104 cell/mL。

注意事项:

1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。

2. 加试剂二后需反复剧烈振荡,使待测液中甘油三酯得到充分提取,振荡幅度、时间、反复次数以及等待分层时间均应保证一致。

3. 为保证试验的重复性,每次水浴后的冷却时间要统一。若测定管 OD 值大于 1.5 时,建议将样本用试剂一适当稀释后再进行检测,并在计算时需乘以相应的稀释倍数。


上一篇:肝脂酶(HL)活性检测试剂盒-肝脂酶(HL)试剂盒-上海液质
下一篇:辅酶Ⅰ NAD(H)含量检测试剂盒-辅酶Ⅰ NAD(H)检测试剂盒-上海液质

独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到

咨询热线
400-998-2324
欢迎关注官方微信
版权所有:上海液质检测技术有限公司    网站备案号:沪ICP备2022005945号
400-998-2324
0.048631s