上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

溶液的配制：

1、 试剂一：自备玻璃空瓶，正庚烷和异丙醇按体积比 1:1 混合，盖紧后混匀；

2、 标准品：临用前加 5 mL 试剂一，即 1 mg/mL 甘油三酯标准溶液，4℃保存。

产品说明：

TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不仅是细胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。测定原理：用异丙醇抽提取 TG，KOH 皂化 TG 后水解生成甘油及脂肪酸，过碘酸氧化甘油生成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质，在 420nm 有特征吸收峰，其颜色的深浅与 TG 含量成正比。

技术指标：

最低检出限：0.0372 mg/mL

线性范围：0.0625-3 mg/mL

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、研钵/匀浆器、微量玻璃比色皿/96 孔板、水浴锅、可调式移液枪、正庚烷、异丙醇、蒸馏水、玻璃空瓶。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1、 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清待测。

2、 细胞、细菌：先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内，离心弃上清，加 1mL 试剂一，超声波破碎 1min（强度 20%，超声 2s，停 1s），8000g，4℃离心 10min，取上清待测。

3、 血清（浆）等液体样本：直接测定。

二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长到 420 nm，蒸馏水调零。

2. 水浴锅预热到 65℃。加试剂一后充分混匀，再加试剂二，剧烈振荡 30s，静置 3-5min 后再剧烈震荡 30s，如此反复 3 次，常温静置一定时间分层后取上层溶液 30μL，置于新的 EP 管中。

3. 甘油三酯含量测定：

冷却后吸取 200μL 至微量玻璃比色皿/96 孔板测定 420nm  处吸光度，记为 A 空，A 标和 A 测。（空白管和标准管需检测 1-2 次。）

三、TG 计算公式

           1. 血清（浆）中甘油三酯含量：

TG 含量（mg/dL）=C 标准品×（A 测-A 空）÷（A 标-A 空）×100=100×（A 测-A 空）÷（A 标-A 空）

C 标准品：1mg/mL；100：单位换算系数，1dL=100mL。

2. 组织中甘油三酯含量：

 (1) 按样本蛋白浓度计算

TG 含量（mg/ mg prot）=C 标准品×V×（A 测-A 空）÷（A 标-A 空）÷（Cpr×V）=（A 测-A 空）÷（A 标-A 空）÷ Cpr

   (2) 按样本质量计算

TG 含量（mg/ g 质量）=C 标准品×V×（A 测-A 空）÷（A 标-A 空）÷W=（A 测-A 空）÷（A 标-A 空）÷ W C 标准品：1mg/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V：加入试剂一的体积，1mL。

3. 细胞、细菌中甘油三酯含量：

TG 含量（mg/104 cell）=C 标准品×（A 测-A 空）÷（A 标-A 空）÷细菌或细胞密度=（A 测-A 空）÷（A 标-A 空）÷细菌或细胞密度C 标准品：1mg/mL；细菌或细胞密度：104 cell/mL。