上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-5054 | 规格:100T/96S | 微量法 |
货号:UPLC-MS-5053 | 规格:50T/48S | 可见分光光度法 |
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
提取液 |
液体 110 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂一 |
液体 1.3mL×1 支 |
2-8℃保存 |
试剂二 |
粉剂×2 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三 |
液体 6 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂四 |
液体 6 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂五 |
液体 6 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂二:临用前每瓶加 5.34mL 蒸馏水充分溶解。2-8℃保存 4 周。
产品说明:
生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。
AP-TEMED 系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成 NO2-,NO -与对氨基苯磺酰胺和α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在 530nm 处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与 530nm 的吸光值呈负相关。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/ 匀浆器,冰和蒸馏水。
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、组织样本:按照组织质量(g)︰提取液体积(mL)为 1︰5~10 的比例(建议称取约 0.1 g 组织,加入 1 mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 10000 g,4℃,离心 10 min,取上清,置于冰上待测。
2、液体样本:直接检测。若有浑浊则离心后取上清待测。
3、细胞样本:收集细胞到离心管内,弃上清,按照每 500 万细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细胞(功率 200w, 超声 3s,间隔 10s,重复 30 次),然后 10000g,4℃,离心 10min,取上清,置冰上待测。
1、 分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长至 530 nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、 操作表:
试剂名称(µL) |
空白管 |
测定管 |
试剂一 |
10 |
10 |
试剂二 |
40 |
40 |
充分混匀, 25℃反应 1min |
||
水 |
25 |
|
样品 |
|
25 |
试剂三 |
50 |
50 |
充分混匀, 37℃反应 30min |
||
试剂四 |
50 |
50 |
试剂五 |
50 |
50 |
充分混匀, 37℃显色 20min,在 530nm 处测定空白管和测定管的吸光值,分别记为 A 空白和 A 测定。空白管只需测定 1-2 次。 |
超氧阴离子清除率(%)=(A 空白-A 测定)÷A 空白×100%
1. 样本制备好之后,立刻进行测定,请勿将样本进行长时间的低温保存,以免影响测定结果。
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