上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
| 货号：UPLC-MS-4571 | 规格：100T/48S | 微量法 |
| 货号：UPLC-MS-4570 | 规格：50T/24S |
可见分光光度法 |
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试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
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提取液 |
液体 80 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂一 |
液体 40 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂二 |
粉剂×1 支 |
2-8℃保存 |
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试剂三 |
液体 20 μL×1 支 |
2-8℃保存 |
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试剂四 |
液体 1.5 mL×1 支 |
-20℃保存 |
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试剂五 |
粉剂×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂二：临用前加入 1 mL 蒸馏水，充分溶解；用不完的试剂可分装后保存，-20℃可保存四周，避免反复冻融；
2、 试剂三工作液的配制：液体置于试剂瓶内 EP 管中。临用前根据样本量按试剂三（μL）：蒸馏水（mL）=1μL:12mL 的比例配成试剂三工作液，现用现配，用多少配多少，尽量在 4h 之内用完；
3、 试剂四工作液的配制：可先将试剂四-20℃分装保存。临用前根据样本量按试剂四：试剂一（V:V）=1:9 的比例配成试剂四工作液，现配现用，用不完的试剂放于-20℃可保存两周。
4、 试剂五：粉剂置于试剂瓶内玻璃瓶中，含有 5 mg 维生素 C，临用前加入 2.8 mL 提取液，充分振荡溶解； 配成 10 mmol/L 维生素 C 溶液，用于阳性对照。2-8℃可保存两周。
5、 ABTS 工作液的配制：临用前根据试验所需量按试剂一：试剂二：试剂三工作液（V:V:V）=76:5:4 的比例配成 ABTS 工作液，现用现配，室温避光保存，务必在 30 分钟内使用。
ABTS 法可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定，是使用最广泛的间接检测方法。ABTS 经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子 ABTS 自由基，在 405 nm 或 734 nm 处有最大吸收峰。被测物质加入 ABTS 自由基溶液后，所含抗氧化成分能与 ABTS 自由基发生反应而使反应体系褪色，405 nm 的吸光度下降，在一定范围内其吸光度的变化与自由基被清除的程度成正比。本试剂盒中，通过测定吸光度下降的程度来反映样本清除 ABTS 自由基的能力。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、恒温水浴锅、台式离心机、研钵/粉碎机、烘干箱、30~50 目筛、冰、蒸馏水。
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、植物组织样本的制备：将新鲜样本置于 60℃烘箱烘干至恒重，研钵研碎（或粉碎机粉碎），过 30~50 目筛； 称取约 0.05 g 样本，加入 1 mL 提取液后置于 40℃水浴锅中浸提 30 min；10000 rpm 室温离心 10 min，取上清， 置于冰上待测。
2、红酒、果汁等液体样本：吸取 100 μL 样本溶液加入 900 μL 提取液，旋涡振荡混匀，室温 10000 rpm 离心10 min，取上清，置冰上待测。
3、提取物或者药物：可用提取液配制成一定浓度，如 5 mg/mL。
注意：不同样本清除 ABTS 自由基的能力可能相差很大，为保证实验结果的准确性，样本要根据预实验结果进行适当调整（如清除率大于 90%，建议将提取的样本用提取液进行稀释；清除率小于 5%，建议加大烘干样本质量或液体样本体积进行提取）。
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序号 |
稀释前浓度（mmol/L） |
维生素 C 溶液体积（µL） |
提取液体积（µL） |
稀释后浓度（mmol/L） |
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1 |
10 |
100 |
900 |
1 |
|
2 |
1 |
160 |
40 |
0.8 |
|
3 |
1 |
120 |
80 |
0.6 |
|
4 |
1 |
80 |
120 |
0.4 |
|
5 |
1 |
40 |
160 |
0.2 |
|
6 |
1 |
20 |
180 |
0.1 |
备注：实验中每个标准管需 10µL 维生素 C 溶液。
1、不同样本清除 ABTS 自由基的能力可能相差很大，如果要比较不同样本的 ABTS 自由基清除能力，建议对于同一批样本加入等量的样本，红酒、组织匀浆、果汁等液体样本加入同样体积，提取物（或者药物）配制成同样浓度。在比较时，将样本根据预实验结果进行适当调整，比较同样浓度（相同稀释倍数）的清除率大小。
2、样本建议当天提取当天检测。
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