上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号：UPLC-MS-6001
规格：100T/96S
微量法
货号：UPLC-MS-4120
规格：50T/48S
可见分光光度法
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
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试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
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提取液 |
液体 55 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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试剂一 A |
粉剂×4 瓶 |
常温保存 |
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试剂一 B |
液体 40 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
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标准品 |
粉剂×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂一的配制：临用前取一瓶试剂一 A 加入 10mL 试剂一B，溶解后备用，2-8℃保存一周，若试剂变黄色则已经变质，不能继续使用。
2、 标准品：10mg 木糖。临用前加入 1 mL 蒸馏水配制成 10mg/mL 木糖标准溶液备用。
产品说明：
木糖是一种戊糖。天然D-木糖是以多糖的形态存在于植物中。木糖可以活化人体肠道内的双岐杆菌并促其生长，双歧杆菌是益菌，该菌越多越有益人体健康，食用木糖能改善人体的微生物环境，提高机体的免疫能力；同时木糖在小肠上段吸收后不参与体内的代谢，经肾脏排出。因此，D-木糖的吸收一直作为小肠吸收不良的重要功能指标。D-木糖在强酸条件下水解产生糠醛，糠醛可与间苯三酚反应生成粉红色化合物，在554 nm处有特殊吸收峰，据此可由吸光值计算出样本中木糖的含量。
技术指标：
最低检出限：0.0007 mg/mL
线性范围：0.0078-0.9 mg/mL
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、鼓风烘箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/ 匀浆器、30-50目筛、EP管、冰和蒸馏水。一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
、植物样本：将供试的植物样本在 65℃的鼓风烘箱中烘干，研磨成粉状，过 30-50 目筛。按质量（g）：提取液体积（mL）1 : 50~100 比例（建议称取 10mg 烘干样本，加入 0.5 mL 提取液），涡旋混匀，在 100℃水浴锅中准确水解 2 h，然后 10000 rpm，室温离心 15 min，弃沉淀，取上清液待测。
2、组织样本：按质量（g）：提取液体积（mL）1 : 5~10 比例（建议称取 0.05g 样本，加入 0.5 mL 提取液）， 研磨匀浆后，在 100℃水浴锅中准确水解 2 h，然后于 10000 rpm，室温离心 15 min，弃沉淀，取上清液待测。
3、血清（浆）等液体样本：直接测定。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热30 min以上，调节波长至554 nm，分光光度计用蒸馏水调零。
2、 标准液的稀释：将标准品用蒸馏水稀释至0.8、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625mg/mL的标准溶液备用。
3、 标准液稀释可参考下表：
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序号 |
稀释前浓度（mg/mL） |
标准液体积（µL） |
蒸馏水体积（µL） |
稀释后浓度（mg/mL） |
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1 |
10 |
100 |
900 |
1 |
|
2 |
1 |
160 |
40 |
0.8 |
|
3 |
1 |
200 |
200 |
0.5 |
|
4 |
0.5 |
200 |
200 |
0.25 |
|
5 |
0.25 |
200 |
200 |
0.125 |
|
6 |
0.125 |
200 |
200 |
0.0625 |
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7 |
0.0625 |
200 |
200 |
0.03125 |
|
8 |
0.03125 |
200 |
200 |
0.015625 |
4、 操作表（在0.6 mL EP管中操作）：
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试剂名称（μL） |
测定管 |
标准管 |
空白管 |
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样本 |
50 |
- |
- |
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标准溶液 |
- |
50 |
- |
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蒸馏水 |
- |
- |
50 |
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试剂一 |
250 |
250 |
250 |
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涡旋混匀，准确沸水浴 8min（EP 管盖紧并用封口膜密封，避免水分散失影响体系），冰浴冷却至常温， 测定 554nm 下的吸光度A，分别记为A 测定管、A 标准管、A 空白管，计算 ΔA 标准=A 标准管-A 空白管，ΔA 测定=A 测定管-A 空白管。标准曲线和空白管只需测 1-2 次。 |
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1、标准曲线的绘制：
根据标准管的浓度（x，mg/mL）和吸光度ΔA标准（y，ΔA标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测定（y，ΔA测定）带入公式计算样本浓度（x，mg/mL）。
2、D-木糖含量的计算：
（1） 植物中木糖含量（mg/g）=x×V 提取÷W1=0.5x÷W1
（2） 组织中木糖含量（mg/g）=x×V 提取÷W2=0.5x÷W2
（3） 血清（浆）木糖含量（mg/mL）= x×V 样÷V 样=x
V样：加入样本体积，0.05 mL；V提取：加入提取液的体积，0.5 mL；W1：植物样本的质量，g；W2：组织样本的质量，g
注意事项：
1、 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
2、 试剂一B因有强烈刺激性气味，过多吸入对人体有害，故建议在通风橱中进行操作。
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