上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-4279
规格:100T/96S
微量法
货号:UPLC-MS-4278
规格:50T/48S
可见分光光度法
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
粉剂×2 支 |
2-8℃保存 |
试剂二 |
液体 5 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
标准品 |
粉剂×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 标准品:含 10 mg 无水葡萄糖(干燥失重<0.2%),临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解,配制成 10 mg/mL 葡萄糖溶液备用,2-8℃保存 2 周,或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。
2、 工作液的配制:在一支试剂一中加入 1.5 mL 试剂二,充分溶解后使用,如难溶解,可振荡溶解(用不完的试剂可 2-8℃保存一周)。
糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖是指样本中的还原单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的淀粉。
检测原理为蒽酮比色法。可用于可溶性单糖、寡糖和多糖的含量测定,具有灵敏度高﹑简便快捷﹑适用于微量样本的测定等优点。
最低检出限:0.0025 mg/mL
线性范围:0.003125-0.4 mg/mL
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、浓硫酸、研钵/匀浆器和蒸馏水。
称取约 0.1-0.2g 样本,加入 1mL 蒸馏水研磨成匀浆,倒入有盖离心管中,沸水浴 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却后,8000g,常温离心 10min,取上清液于 10mL 试管中,用蒸馏水定容至 10mL,摇匀备用。
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 620nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、调节水浴锅至 95℃。
3、标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至 0.3、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125 mg/mL。
4、标准溶液稀释表:
序号 |
稀释前浓度(mg/mL) |
标准液体积(µL) |
蒸馏水体积(µL) |
稀释后浓度(mg/mL) |
1 |
10 |
100 |
900 |
1 |
2 |
1 |
60 |
120 |
0.3 |
3 |
1 |
80 |
320 |
0.2 |
4 |
0.2 |
200 |
200 |
0.1 |
5 |
0.1 |
200 |
200 |
0.05 |
6 |
0.05 |
200 |
200 |
0.025 |
7 |
0.025 |
200 |
200 |
0.0125 |
实验中每个标准管需 40µL 标准溶液。
4、加样表(在EP 管中反应):
试剂(μL) |
空白管 |
测定管 |
标准管 |
样本 |
|
40 |
|
标准品 |
|
|
40 |
蒸馏水 |
80 |
40 |
40 |
工作液 |
20 |
20 |
20 |
混匀,置 95℃水浴中 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后,于 620nm 处测定吸光值,分别记为 A 空白管、A 测定管、A 标准管,并计算ΔA=A 测定管-A 空白管、ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。(空白管和标曲只要做 1-2 管)
1、标准曲线的建立:
根据标准管的浓度(y,mg/mL)和吸光度 ΔA 标准(x,ΔA 标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将 ΔA
(x,ΔA)带入公式计算样本浓度(y,mg/mL)。
2、按样本质量计算:
可溶性糖(mg/g 质量)= (y×V1)÷ (W×V1÷V2 )=10×y÷W 3、按样本蛋白浓度计算:
可溶性糖(mg/mg prot)= (y×V1)÷ (V1×Cpr )=y÷Cpr
V1:加入样本体积,0.2mL;V2:样本总体积,10mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到