植物类黄酮含量检测试剂盒-植物试剂盒-类黄酮试剂盒



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货号:UPLC-MS-4292 规格:100T/48S  微量法
货号:UPLC-MS-4291 规格:50T/24S  可见分光光度法

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

提取液

液体 60 mL×1 瓶(自备)

常温保存

试剂一

液体 2 mL×1

2-8℃保存

试剂二

液体 2 mL×1

2-8℃保存

试剂三

液体 15 mL×1

2-8℃保存

标准品

粉剂×1

2-8℃保存

标准品稀释液

液体 15 mL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1 提取液:自备 60%乙醇,常温保存;

2 标准品:10 mg 芦丁。临用前加入 1 mL 标准品稀释液配制成 10 mg/mL 标准液备用,2-8℃保存四周。

产品说明:

类黄酮是一类多苯化合物,属于植物次生代谢物,对人体具有消炎,抗菌,降血脂,清除体内羟自由基,预防癌症等作用。

在碱性亚硝酸盐溶液中,类黄酮与铝离子形成在470nm处有特征吸收峰的红色络合物,测定样本提取液在470nm处的吸光值,即可计算样本类黄酮含量。

技术指标:

最低检出限:0.00818 mg/mL

线性范围:0.0097-5 mg/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、烘箱、粉碎仪、30-50目筛、超声清洗仪、60%乙醇、台式离心机、研钵、蒸馏水、水浴锅/恒温培养箱。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)


将样本烘干至恒重,粉碎,过 30-50 目筛之后,称取约 0.1g,加入 1mL 提取液,用超声提取法进行提取,超声功率 300W,温度 60℃,提取 30min。12000rpm,25℃,离心 10min,取上清,用提取液定容至 1mL,待测。

二、测定步骤

1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至470nm,分光光度计用蒸馏水调零。

2. 标准溶液的制备:将10mg/mL芦丁标准溶液用标准品稀释液稀释至2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078、0.039mg/mL备用,具体稀释可参考下表。

序号

稀释前浓度(mg/mL

标准液体积(µL

标准品稀释液体积(µL

稀释后浓度(mg/mL

1

10

250

750

2.5

2

2.5

200

200

1.25

3

1.25

200

200

0.625

4

0.625

200

200

0.3125

5

0.3125

200

200

0.15625

6

0.15625

200

200

0.078

7

0.078

200

200

0.039

8

0.039

200

200

0.02

备注:实验中每个标准管需 60µL 标准溶液。


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