上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
提取液 |
液体 110 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂一 |
粉剂×1 支 |
2-8℃保存 |
试剂二 |
液体 40 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三 |
液体 10 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂四 |
粉剂 0.5 g×1 瓶 |
常温保存 |
溶液的配制:
试剂一:10mg 果糖。临用前加 1mL 蒸馏水溶解,得到 10mg/mL 的果糖标准液,2-8℃保存两周。
产品说明:
|
|
果糖是一种最为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是最甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。在酸性条件下果糖与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。
最低检出限:0.0141 mg/mL
线性范围:0.25-25 mg/mL
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
称取约 0.1g 样本,常温研碎;加入 1mL 提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于 80℃水浴锅中10min(盖紧,以防止水分散失),振荡 3~5 次,冷却至室温后,4000g,常温离心 10min,取上清;加入少量(约2mg)试剂四,80℃脱色 30min(盖紧,以防止水分散失);再加入 1mL 提取液,4000g,常温离心 10min,取上清液测定。
1、 可见分光光度计预热30min 以上,调节波长至480nm,蒸馏水调零。
2、 试剂一的稀释:取200μL 10mg/mL果糖标准液,加入300μL蒸馏水,充分混匀,配制成4mg/mL标准液使用, 现用现配。(实验中每管需要100μL,为减小实验误差,故配制大体积。)
3、 样本测定(在1.5mL EP管中依次加入下列试剂):
试剂(μL) |
空白管 |
标准管 |
测定管 |
样本 |
|
|
100 |
试剂一 |
|
100 |
|
蒸馏水 |
100 |
|
|
试剂二 |
700 |
700 |
700 |
试剂三 |
200 |
200 |
200 |
涡旋混匀,置于 80℃水浴锅中准确反应 10min(盖紧,以防止水分散失),冷却至室温后测定 480nm 处光吸收值,记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管,并计算 ΔA 测定=A 测定管-A 空白管、ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。标准管和空白管只需测 1-2 次。
1、按样本蛋白浓度计算
果糖含量(mg/mg prot)=C标×ΔA测定÷ΔA标准×V 样总÷(Cpr×V 样总)=4×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr 2、按样本质量计算
果糖含量(mg/g 质量)=C标×ΔA测定÷ΔA标准×V 样总÷W =8×ΔA测定÷ΔA标准÷W
C标:标准品浓度,4mg/mL;W:样本质量,g;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;V样总:提取液体积,2mL。
如果样本吸光值大于1.3,建议将样本用提取液稀释后进行测定。计算公式中注意乘以稀释倍数。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到