水土中总磷酸盐含量检测试剂盒



产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 10 mL×1 瓶(自备)

2-8℃保存

试剂二

粉剂×2

2-8℃保存

试剂三

液体 10 mL×1

2-8℃保存

试剂四

粉剂×1

2-8℃保存

试剂五

粉剂×1

2-8℃保存

试剂六

液体 5 mL×1

常温保存

标准品

粉剂×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1 试剂一:浓硫酸 10 mL 自备。

2 试剂二:每瓶临用前加入 15 mL 蒸馏水溶解备用,溶解后 2-8℃保存一周。

3 试剂四:临用前加入 5 mL 蒸馏水,溶解后 2-8℃保存两周。

4 试剂五:临用前加入 5 mL 蒸馏水,溶解后 2-8℃保存两周。

5 标准品:临用前加入 1.4 mL 下述稀释液溶解粉剂,配成 20μmol/mL 的磷标准液,2-8℃保存两周。

6、 稀释液的配制:按蒸馏水体积(mL):试剂一体积(mL):试剂二体积(mL)=10:1:2 的比例混合即可,现用现配。

7 定磷试剂的配制:按 H2O:试剂四:试剂五:试剂六V:V:V:V=2:1:1:1 的比例配制,配好的工作液应为浅黄色。若变色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,工作液应现配现用。

注意:配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。

 

产品说明:

总磷酸盐包含正磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、多聚磷酸盐等各种磷酸盐的形式,反应了水土中的磷酸盐水平,是一个水质和土壤质量评价的重要指标。

在酸性溶液中,在分解剂和高温条件下,将无机磷酸盐和有机磷酸盐水解成正磷酸盐,正磷酸盐可与钼酸铵反应成磷钼酸,在还原剂存在时被还原为磷钼蓝,在660nm处有特征吸收峰。

技术指标:

最低检出限:0.0075 μmol/mL


线性范围:0.0098-5 μmol/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

 

 

可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、30-50目筛、漩涡震荡仪、研钵、EP管、蒸馏水、浓硫酸。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

1. 水样:按照水样体积(mL):试剂一体积(mL):试剂二体积(mL)为 10:1:2 的比例(建议取 1mL 水样,加入 100μL 试剂一和 200μL 试剂二),用封口膜封口,95℃水浴 30min,冷却后待测。

2. 土样:(1)新鲜土样风干,过 30-50 目筛;(2)按照风干土壤质量(g):蒸馏水体积(mL):试剂一体积(mL):试剂二体积(mL)=1:10:1:2(建议称取约 0.1g 土样,加入 1mL 蒸馏水,再加入 100μL 试剂一和 200μL 试剂二),用封口膜封口,95℃水浴振荡 30min,10000g,25℃离心 10min,取上清液待测。

二、测定步骤

1 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至660nm,蒸馏水调零。

2 20μmol/mL标准液用稀释液稀释为2、1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078125、0.039μmol/mL的标准溶液备用。

3 标准溶液稀释表:

序号

稀释前浓度(μmol/mL

标准液体积(µL

稀释液体积(µL

稀释后浓度(μmol/mL

1

20

20

180

2

2

20

25

375

1.25

3

1.25

200

200

0.625

4

0.625

200

200

0.3125

5

0.3125

200

200

0.15625

6

0.15625

200

200

0.078125

7

0.078125

200

200

0.039

4 操作表 (在1.5mL离心管中依次加入下列试剂)  :

 

测定管

标准管

空白管

样本(µL

30

-

-

标准溶液(μL

-

30

-

稀释液(μL

-

-

30

试剂三(µL

45

45

45

定磷试剂(µL

150

150

150

蒸馏水(

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