酸性土壤速效磷含量检测试剂盒



产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

提取液

液体 125 mL×1

2-8℃保存

试剂一

粉剂×1

2-8℃保存

试剂二

粉剂×1

2-8℃保存

试剂三

液体 5 mL×1

常温保存

标准品

液体 1 mL×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1 试剂一:临用前加入 5 mL 蒸馏水,溶解后 2-8℃保存一周;

2 试剂二:临用前加入 5 mL 蒸馏水,溶解后 2-8℃保存一周;

3 标准品:10 μmol/mL 标准磷贮备液;

4 工作液(定磷剂的配制:按 H2O:试剂一:试剂二:试剂三=2:1:1:1 的比例配制,配好的工作液应为浅黄色。若变色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,工作液应现配现用。

注意:配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。

 

产品说明:

速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分,包括全部水溶性磷、部分吸附态磷、易矿化有机态磷以及某些已溶解的沉淀态磷酸盐,土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。

用双酸法提取酸溶性磷和吸附态磷,钼蓝与磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物质,通过测定 660nm 光吸收, 即可计算磷含量。

技术指标:

最低检出限:0.0061 μmol/mL

线性范围:0.03125-6 μmol/mL

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、30-50目筛、漩涡震   荡仪、研钵、EP管、蒸馏水。


操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

 新鲜土样风干,过 30-50 目筛,按照土壤质量(g):提取液体积(mL)为 1:10-20 的比例(建议称取约 0.05g

土样,加入 1mL 提取液),振荡提取 1h,10000g,25℃离心 10min,取上清液待测。二、测定步骤

1 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至660nm,分光光度计用蒸馏水调零。

2 10μmol/mL标准液用提取液稀释为3、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625μmol/mL的标准溶液备用。

3 标准溶液稀释表:

序号

稀释前浓度μmol/mL

标准液体积(µL

提取液体积(µL

稀释后浓度μmol/mL

1

10

150

350

3

2

10

100

400

2

3

2

250

250

1

4

1

250

250

0.5

5

0.5

250

250

0.25

6

0.25

250

250

0.125

7

0.125

250

250

0.0625

4 样本测定:(在1.5mL离心管中或96孔板依次加入下列试剂)

 

测定管

标准管

空白管

样本(µL

20

-

-

标准溶液(µL

-

20

-

提取液(µL

 

 

20

工作液(µL

180

180

180

充分混匀,25℃静置30min

将液体置于微量玻璃比色皿/96孔板中,测定660nm处吸光值A,分别记为A测定管、A标准管和A空白管,ΔA=A

测定管-A空白管,ΔA标准=A标准管-A空白管(空白管只需测1-2次)。

三、速效磷含量计算

1 标准曲线的绘制:

以各个标准溶液的浓度为 x 轴,其对应的ΔA 标准为 y 轴,绘制标准曲线,得到标准方程 y=kx+b,将ΔA 带入方程得到 x(μmol/mL)。

2 速效磷含量的计算:

速效磷含量(μmol/g 质量)=x×V 样÷(V 样×W÷V 样总)=x÷W

V 样:加入样本体积,0.02mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;W:样本质量,g。

 

注意事项:

1、工作液(定磷剂)应现配现用,正常颜色为浅黄色,如有变色或变蓝则均为失效。

2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管或 EP 管等试验器材均要求严格无磷。

3、显色结束后应立即检测。

4、如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。


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