上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-4025 规格:100T/48S 微量法
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 0.5mL×1 支(自备) |
2-8℃保存 |
试剂二 |
粉剂×2 瓶 |
-20℃保存 |
试剂三 |
液体 15 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂四 |
液体 30 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
标准品 |
液体 1 mL×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:自备甲苯,2-8℃保存;
2、 试剂二:临用前取 1 瓶加入 5 mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存 4 周;
3、 标准品:5 mmol/L 的对硝基苯酚溶液。
S-α-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分 之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
S-α-GC能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50 目筛、研钵、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可参考文献)
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50 目筛。
1、 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至340nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、 标准品:取20μL 5mmol/L的对硝基苯酚溶液,加入980μL蒸馏水,充分混匀,配制成100μmol/L标准液使用, 现用现配。(实验中每管需要100μL,为减小实验误差,故配制大体积。)
3、 加样表:
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
风干土样(g) |
0.02 |
0.02 |
- |
- |
试剂一(μL) |
5 |
5 |
- |
- |
振荡混匀,使土样润湿,室温放置15min |
- |
- |
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试剂二(μL) |
80 |
- |
- |
- |
试剂三(μL) |
100 |
100 |
- |
- |
混匀, 37℃水浴1h 后,立即沸水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水/冰浴冷却。 |
- |
- |
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试剂二(μL) |
- |
80 |
- |
- |
10000rpm 25℃离心10min,取上清液 |
- |
- |
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上清液(μL) |
100 |
100 |
- |
- |
标准品(μL) |
- |
- |
100 |
- |
蒸馏水(μL) |
- |
- |
|
100 |
试剂四(μL) |
200 |
200 |
200 |
200 |
充分混匀,室温静置 2min 后,测定吸光值 A,分别记为 A 测定管、A 对照管、A 标准管、A 空白管。计算ΔA=A 测定管-A 对照管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。每个测定管设一个对照管。标准管和空白管只需做 1-2 次
单位的定义:每天每g土样中产生1μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC活力(U/g 土样)=ΔA÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T=0.444×ΔA÷ΔA标准÷W
T:反应时间,1h=1/24d;V反总:反应体系总体积:1.85×10-4L;C标准:标准溶液浓度,100μmol/L;W: 样本质量,g。
若ΔA<0.01,可延长37℃水浴时间;若ΔA>1.5,可将上清液稀释后进行测定;最后计算时注意各个因素的改变。
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