土壤酸性蛋白酶活性检测试剂盒



上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

货号：UPLC-MS-4061                         规格：100T/48S                                          微量法

货号：UPLC-MS-4060              规格：50T/24S                                          可见分光光度法

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 20 mL×1 瓶

2-8℃保存

试剂二

粉剂×1 瓶

2-8℃保存

试剂三

液体 12 mL×1 瓶

2-8℃保存

试剂四

液体 20 mL×1 瓶

2-8℃保存

试剂五

液体 5 mL×1 瓶

2-8℃保存

试剂六

液体 15 mL×1 瓶

2-8℃保存

标准品

液体 1 mL×1 支

2-8℃保存

溶液的配制：

1、 试剂二：临用前加入 10 mL 试剂六，沸水浴搅拌溶解后待用，用不完的试剂 2-8℃保存 1 个月；

2、 标准品：20μmol/mL 酪氨酸溶液。

 

产品说明：

土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。土壤酸性蛋白酶在酸性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。    酸性条件下，土壤酸性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝，在680nm有特征吸收峰。


注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、研钵、   蒸馏水、30-50目筛。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。


二、测定步骤

1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至680nm，分光光度计用蒸馏水调零。

2、 标准溶液的稀释：取10μL 20μmol/mL酪氨酸标准液，加入990μL蒸馏水，充分混匀，配制成0.2μmol/mL标准液使用，现用现配。（实验中每管需要44μL，为减小实验误差，故配制大体积。）

3、 样本测定：

试剂名称

测定管

对照管

标准管

空白管

风干土样（g）

0.05

0.05

-

-

试剂一（μL）

100

100

-

-

试剂二（μL）

50

-

-

-

充分混匀后，37℃水浴/恒温培养箱中反应24h，期间振荡5-6 次，使土样与反应液充分接触。

 

-

 

-

试剂三（μL）

100

100

-

-

试剂二（μL）

-

50

-

-

混匀，10000rpm 室温离心10min，取上清液待测。

-

-

上清液（μL）

44

44

-

-

0.2μmol/mL标准液（μL）

-

-

44

-

蒸馏水（μL）

-

-

-

44

试剂四（μL）

130

130

130

130

试剂五（μL）

26

26

26

26

混匀，40℃水浴或恒温培养箱培养 10min，10000rpm 室温离心 10min，取上清液于 680nm 下读取各管吸光值 A

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