土壤酸性转化酶(S-AI)活性检测试剂盒



上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化elisa土壤植物细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测Elisa代测HPLC 检测GC检测GC-MS 检测LC-MS检测ICP-MS检测 、土壤植物动物成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购

货号:UPLC-MS-4021                         规格:100T/48S                  微量法

货号:UPLC-MS-4020                       规格:50T/24S                可见分光光度法

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 40 mL×1

2-8℃保存

试剂二

粉剂×2

2-8℃保存

试剂三

液体 10 mL×1

2-8℃保存

标准品

粉剂×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1 试剂二:临用前取 1 瓶加入 5 mL 试剂一充分溶解备用,用不完的试剂 2-8℃保存 2 周;

2、 标准品:10 mg 无水葡萄糖。临用前加入 1 mL 试剂一充分溶解,制备 10 mg/mL 葡萄糖标准溶液待用 2-8℃

保存两周。

产品说明:

S-AI pH 4.5~5.0(酸性)条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代谢关键酶之一。S-AI 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 540nm 有特征光吸收,在一定范围内 540nm 光吸收增加速率与 S- AI 活性成正比。

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、恒温培养箱/水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、蒸馏水、30-50 目筛、冰、甲苯(不允许快递)。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可参考文献) 

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30~50 目筛。

二、测定步骤

1 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,分光光度计蒸馏水调零。

2 标准液的稀释:将10mg/mL葡萄糖标准液用试剂一稀释至0.4、0.3、0.2、0.1、0.08、0.06 mg/mL的葡萄糖标准液备用。

3 标准液稀释表

序号

稀释前浓度mg/mL

标准液体积(µL

试剂一体积(µL

稀释后浓度(mg/mL

1

10

50

950

0.5

2

0.5

160

40

0.4

3

0.5

120

80

0.3

4

0.5

80

120

0.2

5

0.5

40

160

0.1

6

0.5

32

168

0.08

7

0.5

24

176

0.06

备注:试验中每个标准管需标准品160µL。

4 样本测定:

试剂名称

测定管

对照管

标准管

空白管

风干土样(g

0.02

0.02

-

-

试剂一(μL

-

160

-

160

试剂二(μL

160

-

-

-

标准液(μL

-

-

160

-

甲苯(μL

4

4

4

4

混匀, 37℃水浴/恒温培养箱准确反应1h后,煮沸10min左右盖紧,以防止水分散失),流水或冰浴冷却后充分混匀(以保证浓度不变),10000rpm,常温离心10min,取上清。

上清(μL

140

140

140

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