上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家,并承接生化代测,Elisa代测,HPLC 检测,GC检测,GC-MS 检测,LC-MS检测,ICP-MS检测 、土壤、植物、动物,成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
货号:UPLC-MS-4078 规格:50T/48S 可见分光光度法
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
粉剂×2 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂二 |
液体 100 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
标准品 |
粉剂×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:临用前取 1 瓶加入 2 mL 浓硫酸充分溶解。配制好后尽快使用,2-8℃可保存一周。
2、 标准品:10 mg 硝酸钾。临用前加入 1.386 mL 蒸馏水溶解,配成 1000 μg/mL 的 NO --N 标准液,2-8℃保存两周。
硝态氮是指硝酸盐中所含有的氮元素,土壤中硝态氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,其含量直接关系到作物的产量与品质。在浓酸条件下,NO -与水杨酸反应生成硝基水杨酸,在碱性条件下(pH>12)呈黄色,其颜色深浅与含量成正比,即可计算得硝态氮含量。
最低检出限:0.0495 μg/mL
线性范围:0.1953125-80 μg/mL
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、振荡器、浓硫酸、蒸馏水。
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
按照土壤质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 土样,加入 1mL 蒸馏水)加入蒸馏水,置于震荡仪中振荡提取 1h,10000g,25℃离心 10min,取上清待测。(土样要求参考注意事项 1.2.3.)。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 410nm,蒸馏水调零。
2、 标准溶液的稀释:取 25μL 1000μg/mL NO3--N 标准液,加入 975μL 蒸馏水,充分混匀,配制成 25μg/mL 标准液使用,现用现配。(实验中每管需要 40μL,为减小实验误差,故配制大体积)。
3、 操作表:
试剂名称(μL) |
测定管 |
标准管 |
空白管 |
样本 |
40 |
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标准溶液 |
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40 |
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蒸馏水 |
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40 |
试剂一 |
60 |
60 |
60 |
充分混匀,置于 25℃水浴锅反应 30min |
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试剂二 |
1400 |
1400 |
1400 |
涡旋振荡,使出现的沉淀充分溶解,取 1mL 反应液于 1mL 玻璃比色皿中测定 410nm 处吸光值 A,记为A 测定管,A 标准管,A 空白管。计算 ΔA 测定=A 测定管-A 空白管,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管。标准管 与空白管只需测 1-2 次。 |
NO --N 含量(μg/g 土样)=ΔA 测定÷ΔA 标准×C 标准×V 提取÷W=25×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W W:样本质量,g;C 标准:标准溶液浓度,25μg/mL;V 提取:提取液体积,1mL。
1、 土壤胶体不吸附硝酸根离子,且其易溶于水,在土壤内部移动,所以测定多个样本或者重复样本室注意保持相同的采样深度。
2、 土壤经风干或者烘干很容易引起硝态氮含量的变化,所以建议采用新鲜土壤进行测定。样品采集后应于 4℃ 下密封运输和保存,并在 3d 内分析完毕。否则,应于-20℃(深度冷冻)下以小块、小份保存,样品中硝酸盐氮可以保存数周。当测定深度冷冻的硝酸盐氮含量时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在 4 h 内完成样品解冻、匀质化和提取;如果在 4℃下解冻,解冻时间不应超过 48 h
3、 如果要比较不同样本间的硝态氮含量,需将土样烘干后按干重计算后再进行比较。
4、 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性,操作时需做好防护措施。
5、 如果吸光值大于 1.5,建议将样本用蒸馏水稀释后再进行测定。
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