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货号:UPLC-MS-4037 规格:100T/48S 微量法
试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
试剂一 |
液体 1 mL×1 支(自备) |
2-8℃保存 |
试剂二 |
液体 7.5 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂三 |
粉剂×2 瓶 |
2-8℃保存 |
试剂四 |
液体 30 mL×1 瓶 |
2-8℃保存 |
标准品 |
粉剂×1 支 |
2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:自备甲苯;
2、 试剂三:临用前取 1 瓶加入 11 mL 蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂 2-8℃保存 2 周;
3、 标准品:含 10 mg 无水葡萄糖(干燥失重<0.2%)。临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解备用,2-8℃可保存 2 周, 或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。
S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。
S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 540nm 有特征光吸收,在一定范围内 540nm 光吸收增加速率与 S-SC 活性成正比。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、30-50 目筛、冰、研钵、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,研磨,过 30-50 目筛。
1. 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm,分光光度计蒸馏水调零。
2. 标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至 0.5、0.4、0.3、0.2、0.1mg/mL,可参考下表。
序号 |
稀释前浓度(mg/mL) |
标准液体积(µL) |
蒸馏水体积(µL) |
稀释后浓度(mg/mL) |
1 |
10 |
100 |
900 |
1 |
2 |
1 |
100 |
100 |
0.5 |
3 |
1 |
80 |
120 |
0.4 |
4 |
1 |
60 |
140 |
0.3 |
5 |
1 |
40 |
160 |
0.2 |
6 |
1 |
20 |
180 |
0.1 |
备注:实验中每个标准管需 85µL 标准溶液。
3. 加样表:
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
空白管 |
风干土样(g) |
0.03 |
0.03 |
- |
- |
试剂一(μL) |
5 |
5 |
- |
- |
振荡混匀,使土样全部湿润,37℃水浴或恒温培养箱 15min |
||||
试剂二(μL) |
75 |
75 |
- |
- |
试剂三(μL) |
220 |
- |
- |
- |
蒸馏水(μL) |
- |
220 |
- |
- |
混匀,放入 37℃水浴或恒温培养箱培养 24 小时,10000g,4℃,离心 5min,取上清液,将培养结束的上
清液稀释 10 倍(取 0.1mL <
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