土壤蔗糖酶( S-SC)活性检测试剂盒



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货号:UPLC-MS-4037          规格:100T/48S         微量法

货号:UPLC-MS-4036        规格:50T/24S          可见分光光度法

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。


试剂名称

规格

保存条件

试剂一

液体 1 mL×1 支(自备)

2-8℃保存

试剂二

液体 7.5 mL×1

2-8℃保存

试剂三

粉剂×2

2-8℃保存

试剂四

液体 30 mL×1

2-8℃保存

标准品

粉剂×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1 试剂一:自备甲苯;

2 试剂三:临用前取 1 瓶加入 11 mL 蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂 2-8℃保存 2 周;

3 标准品:含 10 mg 无水葡萄糖(干燥失重<0.2%)。临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解备用,2-8℃可保存 2 周, 或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。

产品说明:

S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。

S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 540nm 有特征光吸收,在一定范围内 540nm 光吸收增加速率与 S-SC 活性成正比。

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、30-50 目筛、冰、研钵、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,研磨,过 30-50 目筛。

二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 540nm,分光光度计蒸馏水调零。

2. 标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至 0.5、0.4、0.3、0.2、0.1mg/mL,可参考下表。

序号

稀释前浓度(mg/mL

标准液体积(µL

蒸馏水体积(µL

稀释后浓度(mg/mL

1

10

100

900

1

2

1

100

100

0.5

3

1

80

120

0.4

4

1

60

140

0.3

5

1

40

160

0.2

6

1

20

180

0.1

备注:实验中每个标准管需 85µL 标准溶液。

3. 加样表:

试剂名称

测定管

对照管

标准管

空白管

风干土样(g

0.03

0.03

-

-

试剂一(μL

5

5

-

-

振荡混匀,使土样全部湿润,37℃水浴或恒温培养箱 15min

试剂二(μL

75

75

-

-

试剂三(μL

220

-

-

-

蒸馏水(μL

-

220

-

-

混匀,放入 37℃水浴或恒温培养箱培养 24 小时,10000g4℃,离心 5min,取上清液,将培养结束的上

清液稀释 10  0.1mL <

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